首页 > 文献资料
-
空间诱变致生长减慢CHO(dhfr-)细胞株的特性
目的了解空间环境下生物工程细胞CHO(dhfr-)在形态、生长和周期等方面的变化.方法将CHO(dhfr-)生物工程细胞株搭载于我国第18颗返回式卫星,返地的细胞在倍增之前进行单克隆化.从中随机选取4株细胞,经5代培养确定一株生长速度慢的细胞株,利用光镜、MTT法、FCM分析法观察细胞生长特性.结果返地后的CHO(dhfr-)细胞经过单克隆化、扩增,获得159个细胞株.经空间诱变后的细胞出现细胞形态改变、生长增殖速度减慢、G1期细胞明显增多.结论生物工程CHO(dhfr-)细胞经空间诱变可引起生长特性的改变,为筛选优化的生物工程制药细胞提供可能.
关键词： CHO(dhfr-)细胞 空间 生长特性 -
低温细胞生存系统长期保存CHO细胞的初步研究
目的验证基因工程细胞空间搭载系统在低温(18 ℃-30 ℃、无源等条件下保存细胞的可行性,观察此系统对生物工程细胞CHO(dhfr-)生长特性的影响.方法将CHO(dhfr-)生物工程细胞株在空间搭载系统中培养25 d后,利用光镜、MTT法、FCM分析、3H掺入法及染色体分析观察细胞生长特性.结果细胞低温培养25 d后,CHO(dhfr-)细胞呈多种形态;细胞周期变化差异不显著;染色体无断裂;细胞生长速度显著减慢;大分子生物合成显著增加.结论空间搭载系统搭载CHO(dhfr-)细胞进入空间后,虽然细胞产生了许多生理性变化,但能使CHO(dhfr-)细胞生存下来.利用空间搭载系统搭载细胞是完全可行的.
关键词： 低温 空间搭载系统 CHO(dhfr-)细胞 生长特性 -
人CD28-Fc融合蛋白在真核细胞中的表达与纯化
目的建立稳定表达CD28-Ig融合蛋白系统,提供用于研究的CD28-Ig融合蛋白.方法构建高表达的真核细胞表达载体,利用FAD批准的、可用于生产人用重组蛋白药物的CHO细胞进行表达,MTX加压筛选出稳定表达的细胞株.蛋白A纯化获得电泳纯融合蛋白.结果经RT-PCR,SDS-PAGE及Western印迹鉴定,CHO细胞上清中纯化的蛋白是CD28与Ig的融合蛋白,并获得纯度较高的融合蛋白.结论成功建立CD28-Ig融合蛋白表达体系,并获得稳定表达融合蛋白的细胞株,为T细胞活化第二信号系统的基础研究奠定了基础.
关键词： CD28-Ig融合蛋白 CHO(dhfr-)细胞 稳定表达
