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人巨细胞病毒感染对人胚肺成纤维细胞Cdt1与Geminin因子表达的影响
目的 研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染对人胚肺成纤维(human embryonic lung fibroblasts,HEL)细胞Cdtl与Geminin因子表达的影响.方法 用血清饥饿法同步化HEL细胞于G0/G1期,流式细胞术测细胞周期;用HCMV感染同步化的HEL细胞作为感染组,同时设模拟感染组为对照组.于感染后12、24、48、72和96 h收获细胞,提取总的RNA,采用半定量逆转录-聚合酶链反应检测Cdtl-mRNA和Geminin-mRNA的表达水平.结果 (1)血清饥饿后的HEL细胞82.8%处于G0/G1期.(2)12、24、48和72 h两组HEL细胞Cdtl mRNA表达水平比较均有统计学意义(t值分别为32.231,6.349,-5.846,-1.573;P均为0.000),12和24 h时感染组较模拟感染组明显降低,48和72 h时感染组较模拟感染组明显升高.(3)12、24、48和72 h两组HEL细胞Geminin mRNA表达水平比较均有统计学意义(t值分别为-8.891,-6.483,13.010,10.572;P均为0.000),12和24 h时感染组较模拟感染组明显增加,48和72 h时模拟感染组较感染组明显升高.结论 (1)血清饥饿法将绝大部分细胞同步于G0/G1期,血清饥饿法同步化HEL细胞效果较佳.(2)HCMV能诱导Cdtl及Geminin因子表达异常,使Geminin/Cdtl平衡失调,这可能是HCMV感染导致细胞周期阻滞于G1期的机制.
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纳米氧化锌对人胚肺成纤维细胞的生物毒性
[目的]研究化妆品添加剂-氧化锌纳米粒子对正常人胚肺成纤维细胞(HELF)的生物毒性.[方法]采用MTT法检测氧化锌纳米粒子对体细胞存活率的影响;利用光学显微镜评价细胞的形态学变化;电子显微镜观察细胞与纳米氧化锌作用前后表面微结构的变化.[结果]在测试的2.5～150 mg·L-1浓度范围内,氧化锌纳米粒子对HELF细胞均有抑制作用,细胞毒性呈明显的剂量依赖效应关系.浓度在20 mg·L-1以上时,氧化锌纳米粒子可致使细胞生存率低于10%.荧光显微镜可见典型的细胞凋亡改变.扫描电子显微镜观察到HELF细胞表面与高浓度纳米粒子作用后产生的纳米级孔.[结论]纳米氧化锌粒子由于小尺寸效应和Zn2+自身毒性的协同作用,高浓度时抑制细胞结活性,致使细胞死亡.在化妆品中添加氧化锌纳米粒子作为紫外屏蔽剂时,建议控制浓度为20 mg·L-1以下.旨在对化妆品生产企业在功效添加方面起到警示作用,也为卫生监督提供理论依据.
