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IKKε通过E-cadherin调控人脑胶质瘤迁移和侵袭能力的实验研究
目的 探讨胶质瘤细胞中IKKε对E-cadherin表达的调控作用及其对胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响.方法 构建IKKε过表达载体及IKKε shRNA慢病毒,以IKKε过表达质粒转染TP483胶质瘤细胞株,上调胶质瘤细胞中IKKε的表达水平;以IKKε shRNA慢病毒转染U251、U138胶质瘤细胞株,下调胶质瘤细胞中IKKε的表达水平.采用RT-PCR和Western blot检测细胞中IKKε及E-cadhenn的表达;应用免疫荧光法观察转染后IKKε及E-cadherin表达的变化.通过划痕实验和Transwell法分别检测细胞的迁移和侵袭能力.结果 与未转染组(TP483对照组)相比,转染IKKε的过表达质粒组(TP483处理组)的IKKε蛋白的表达水平升高(P =0.000),而E-cadherin蛋白的表达水平降低(P=0.000).转染IKKε shRNA的胶质瘤细胞(U251处理组和U138处理组)中IKKε蛋白的表达水平较未转染组(U251对照组和U138对照组)明显降低(均P＜0.05),同时各处理组E-cadherin蛋白的表达水平均较其对照组升高(均P ＜0.05).TP483处理组划痕修复率较对照组高[(56.39±0.93)％对比(46.43±1.68)％,P=0.035)].过表达质粒转染24h后,TP483处理组穿过滤膜的细胞数目较对照组增加[(55.8±6.0)个对比(24.6±2.3)个,P =0.000].U251、U138处理组划痕修复率较其各自的对照组降低[U251处理组:(50.40±1.09)％,U251对照组:(87.29±11.11)％,P=0.043;U138处理组:(48.20±1.34)％,U138对照组:(73.15±6.62)％,P=0.035)].IKKε shRNA转染24h后,U251、U138处理组穿过滤膜的细胞数目较对照组少([U251处理组:(77.8±6.4)个,U251对照组:(124.0±13.4)个,P=0.000;U138处理组:(25.8±4.2)个,U138对照组:(54.8±7.1)个,P=0.000].结论 IKKε低表达可有效抑制胶质瘤细胞的侵袭和迁移,而IKKε高表达可增强其侵袭和迁移能力.其可能的机制是通过调节E-cadherin的表达水平从而影响胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力.
