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复合探针法文献资料
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霍乱弧菌O139实时荧光PCR检测方法的建立及应用
目的:建立检测霍乱弧菌O139的实时荧光PCR检测方法,为霍乱弧菌O139的检测提供快速、敏感、特异的检测手段.方法:用复合探针法荧光PCR检测技术,检测O139特异基因--编码糖基转移酶的基因.结果:本方法特异性好,检测非O139肠道菌均无响应;灵敏度高,可检测低至10 CFU的细菌;重复性较好,批间批内变异系数均小于3%.对采自浙江省O139霍乱弧菌感染患者的335份标本进行检测,共有133份为阳性,而采用常规细菌培养法,仅检测出90份阳性.结论:本方法的建立为霍乱的诊断提供了又一有效手段.
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复合探针实时荧光PCR检测大肠杆菌O157:H7
目的建立一种快速、准确、特异的肠出血性大肠杆菌O157:H7的定量检测方法.方法以rfbE基因作为待检靶基因,根据复合探针荧光定量分析原理设计检测引物和探针,建立检测大肠杆菌O157:H7的实时荧光定量PCR方法.并对本方法检测的特异性、灵敏度、重复性等进行评价.结果所有O157:H7的检测结果均为阳性,而所有其它菌株检测结果均为阴性;该方法检测的灵敏度可达10 cfu·mL-1,定量检测的批间和批内差异均小于5%.在模拟污染牛奶中,可检出1×101 cfu·μL-1的细菌.结论本文建立的复合探针实时荧光定量PCR技术能快速准确、特异、敏感地对大肠杆菌O157:H7进行定量分析,为大肠杆菌O157:H7的检测提供了新的方法.
关键词： 大肠杆菌O157:H7 实时荧光PCR 复合探针法
