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薯蓣皂苷的次皂苷元B(DRG)体外诱导人大肠癌HCT-15细胞凋亡的机制研究
目的 探讨中药单体薯蓣皂苷的次皂苷元B(DRG)体外诱导HCT-15细胞凋亡的分子作用机制.方法 采用Western blotting、体外Bcl-xL蛋白竞争结合检测实验及逆转录PCR(RT-PCR)对DRG诱导细胞凋亡的机制进行了研究.结果 在HCT15细胞中,DRG促发了线粒体调控的凋亡途径,细胞色素c呈时效性地从线粒体中释放到胞质中,同时Bax与Bcl-2蛋白表达的相对比例上调,caypase-9、caspase-3和PARP等被剪切成具有活性的片段,但是caspase-7却未见剪切,同时还不影响P53和Bcl-xL的表达；而与死亡受体途径相关的FADD表达无明显变化,caspase-8酶原也未见剪切；另外,DRG也不抑制BH3短肽与Bcl-xL 的结合；RT-PCR检测结果表明,DRG诱导HCT-15细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax的mRNA水平的改变,进而导致Bcl-2蛋白表达水平下降,而Bax蛋白表达水平则明显增加,说明DRG诱发的细胞凋亡中涉及到Bcl-2和Bax基因水平的变化.结论DRG诱发HCT-15细胞凋亡的分子机制在于从基因水平影响Bax和Bcl_2靶基因的转录表达,上调Bax/Bcl-2蛋白表达水平比例,并终通过激活经典的线粒体途径而不是死亡受体途径来发挥其HCT-15细胞凋亡诱导作用,且对P53呈非依赖型.
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薯蓣皂苷的次皂苷元B体外诱导人慢性髓系白血病细胞K562凋亡的研究
背景与目的:我们从福州薯蓣的根茎中首次分离得到薯蓣皂苷的次皂苷元B(P.B),并发现P.B能够显著抑制多种人肿瘤细胞的增殖.本研究的目的在于探讨P.B是否通过诱导细胞凋亡而发挥其抑制肿瘤细胞增殖的作用.方法:采用荧光及透射电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;库尔特全自动颗粒粒度分析仪分析药物引起K562细胞体积大小分布的变化;琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯状带,流式细胞术检测细胞凋亡时的变化.结果:10 μmol/L P.B处理K562细胞24 h时,细胞产生典型的核内染色质凝结、核片段化、细胞体积缩小及凋亡细胞表面膜出泡等形态学特征.10 μmol/L P.B分别处理K562细胞6、12及24 h时,能够使细胞产生明显的DNAladder和体积变化,呈一定的时效关系,并且亚G1峰的凋亡细胞随作用时间的延长而增加,分别为6.12%(6 h)、35.6%(12 h)和45.7%(24 h).结论:P.B可能通过诱导K562细胞凋亡而发挥其抗K562细胞增殖的作用.
关键词： 薯蓣皂苷的次皂苷元B 福州薯蓣 细胞凋亡
