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脓毒血症时大鼠心肌G 蛋白的变化
目的:研究脓毒血症时大鼠心肌G 蛋白的变化.方法:免疫印迹法测定大鼠心肌细胞膜Gsα、Giα2和Giα3的含量,放射免疫法测定各组心肌腺苷酸环化酶的活性.结果:脓毒血症时Gsα表达无明显变化.脓毒血症晚期Giα2和Giα3含量分别升高53.5%(P＜0.05)和63.7%(P＜0.01).基础及Gpp(NH)P刺激的腺苷酸环化酶活性在脓毒血症晚期明显抑制.结论:大鼠心肌Gi的增加参与脓毒血症时腺苷酸环化酶信号转导系统功能障碍的发生.
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Giα2和Giα3蛋白在心脏缺血预处理中的作用
目的:研究离体大鼠心脏缺血预处理对G蛋白的影响.方法:免疫印迹法测定心肌细胞膜Giα2、Giα3和Gsα含量;放射免疫法测定腺苷酸环化酶活性.结果:与对照组相比,缺血-再灌注组心功能受到明显损伤,缺血预处理组心功能显著恢复.各组心脏Gsα含量无明显变化;缺血-再灌注组Giα含量明显升高,腺苷酸环化酶活性降低;缺血预处理组与缺血-再灌注组相比Giα2和Giα3含量分别下降41.3%和34.5%,腺苷酸环化酶活性升高.结论:缺血-再灌注可引起腺苷酸环化酶信号转导系统功能障碍,缺血-预处理可明显减轻缺血-再灌注损伤,使细胞膜信号转导功能恢复.
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正常小鼠离体胰岛功能与垂体腺苷酸环化酶激活肽-38的关系
目的:探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽-38(pituitary adenylate cyclase ac-tivating polypeptide-38,PACAP-38)对离体正常小鼠胰岛功能的影响.方法:用胶原酶和DNA酶联合消化法分离NMRI小鼠胰岛,RPMI1640组织培养液过夜培养,采用Millipore Multiscreen系统观察不同浓度PACAP-38对胰岛功能的影响.放免法测定孵育液中胰岛素和胰高血糖素浓度.结果:①离体胰岛胰岛素的分泌依赖于孵育液中葡萄糖的浓度,PACAP-38显著刺激胰岛素的释放,且刺激强度依赖于葡萄糖浓度和自身浓度.当孵育液中葡萄糖浓度为5 mmol/L时,PACAP-38在l×10-9mmol/L以上才能显著刺激胰岛素分泌[(6.12±0.26)fmol/(min·胰岛)];而当孵育液中葡萄糖浓度为10 mmol/L时,PACAP-38在1×10-11 mmol/L就可显著刺激胰岛素分泌[(22.87±1.35)fmol/(min·胰岛)](t=4.227 1～7.794 4,P＜0.01).②离体胰岛胰高血糖素的分泌明显受到孵育液中葡萄糖的浓度的抑制.在低糖环境(葡萄糖浓度在0和2.5 mmol/L时)中,1×10-9mmol/L PACAP-38可显著抑制胰高血糖素的分泌,且其抑制作用呈明显的浓度依赖型(在葡萄糖浓度为0 mmol/L时,IC50=1×10-10 mmol/L).而当孵育液中葡萄糖浓度为5和10 mmol/L时,1×10-9 mmol/L PACAP-38对胰高血糖素分泌的抑制作用消失.结论:PACAP-38可刺激离体胰岛胰岛素的释放,抑制胰高血糖素的分泌,且其作用具有自身浓度和葡萄糖浓度依赖性.
