利用CRISPR/Cas9系统构建PCGF1基因敲除MCF7稳定细胞系
摘要： [目的]构建PCGF1 (Polycomb Group Ring Finger 1)基因敲除的MCF-7稳定细胞系.[方法]以PCGF1序列为模板,设计sgRNA干扰序列,两端加入载体连接序列.通过DNA片段合成所需sgRNA序列.退火形成oligo二聚体序列后,使用T4 DNA连接酶重组干扰序列与pCAG-T7-Cas9-pgk-Puro-T2A-GFP质粒.测序鉴定后,将pCAG-T7-Cas9-gRNA-pgk-Puro-T2A-GFP重组载体通过脂质体转染MCF7细胞系.通过嘌呤霉素进行阳性克隆筛选,Western blotting检测PCGF1表达.[结果]测序结果显示构建的重组载体序列正确.转染筛选后,western blotting验证构建的MCF7细胞系PCGF1表达明显降低.[结论]利用pCAG-T7-Cas9-pgk-Puro-T2A-GFP质粒,成功构建PCGF1敲低载体.转染MCF7细胞系,通过嘌呤霉素筛选和westernblotting验证得到PCGF1稳定敲低的MCF7细胞系.
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他巴唑电离子导入治疗Graves病75例疗效观察
1999年6月-2002年6月期间,我们对75例Graves病患者采用电离子导入他巴唑治疗,取得较好的疗效,现报告如下.1资料和方法1.1病例选择本组病例均为我院或广西区人民医院内分泌科门诊或住院患者.根据临床诊断标准确诊Graves病,所有患者均于治疗前检测T3、T4、FT3、FT4水平,白细胞计数测定及肝功能检测.本组75例中,男30例,女45例,年龄10～69岁,甲状腺Ⅰ°肿大40例,Ⅱ°肿大27例,Ⅲ°肿大8例.其中初发28例,甲状腺术后复发5例,121Ⅰ治疗后复发3例,口服抗甲状腺药物治疗后复发31例,口服抗甲状腺药物出现粒细胞减少而中断治疗8例.
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围生期颅内静脉窦血栓形成的护理体会
围生期颅内静脉窦血栓形成是发生于妊娠末期及产褥期的缺血性脑血管病,由于现代神经影像技术和治疗手段的进展,使该疾病能够及时得到明确诊断,治愈的患者亦渐趋增加,但仍有5%～30%的患者死亡,或遗留癫痫、肢体活动不灵及智能障碍等后遗症[1,2].因此,加强对本病的预防、早期诊断与及时治疗是临床医护人员的重要课题.此外,颅内静脉窦血栓形成患者的护理也是降低死亡率、减少致残率的一个重要因素.我院妇产科2006年8月收治了2例围生期颅内静脉窦血栓形成患者,现将护理体会报告如下.
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29例颅脑损伤深静脉血栓患者护理对策及原因分析
深静脉血栓(deep venous thrombosis,DVT)是指血液在深静脉内不正常地凝结、阻塞管腔,导致静脉同流障碍.DVT在全身主干静脉均可发生,尤以下肢常见,手术平均并发率为25%～30%.我科近年来收治了29例颅脑损伤深静脉血栓患者,我们对其发病原因进行分析,并采取相应的护理对策,取得了良好效果.
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脾部分切除治疗外伤性脾破裂62例
自1993年2月～2001年4月,我院共收治外伤性脾破裂92例,其中62例行脾脏部分切除,全部治愈,效果良好,现报告如下.
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超敏C反应蛋白检测对急性心肌梗死的诊断价值
心肌梗死(myocardial infarction,MI)是心肌缺血性坏死.为在冠状动脉病变的基础上,发生冠状动脉血供急剧减少或中断,使相应的心肌严重而持久地急性缺血导致心肌坏死.急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)会出现严重的并发症如心律失常、心源性休克、心力衰竭等,有着较高的死亡率,近年来该病在我国有发病率增加和低龄化得趋势,故对该病的第一时间正确诊断和及时治疗有着重大的临床意义.大量资料显示,冠心病的发生过程中动脉硬化斑块的形成,是一种全身心血管系统的慢性炎症反应的结果[1].C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)是一种能与肺炎链球菌菌株C-黏多糖发生沉淀反应的急性时相反应蛋白.
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重度妊高症并发脑中风抢救成功1例
1 临床资料患者,24岁,因停经39w,血压升高3w于1999年1月12日入院.生育史G1P0.基础血压14/10Kpa,于36孕周时发现血压18/12Kpa后,每日测血压波动于(21.0～12.0)/(17.0～9.0)Kpa之间,无自觉症状.入院时查双小腿水肿,24h内血压波动于(22.0～12.0)/(17.0～8.0)Kpa之间,尿蛋白(++),眼底高血压1级改变,肝肾功正常.入院后给硫酸镁10g/d静滴,睡前肌注5g,血压控制在20/14Kpa以内.入院后第70h出现规律宫缩,第一产程顺利,宫口开全后因枕左横位胎吸助娩一活男婴,1分钟apgar评分8分,产时血压在(20.5～12.0)/(16.0～9.0)Kpa之间,产后血压降至(14.0～12.0)/(10.0～8.0)Kpa间,无不适.
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慢性肝病患者载脂蛋白A1和B的变化
为了解慢性肝病患者脂蛋白代谢情况,我们检测了慢性肝病78例患者血清脂蛋白及肝功能指标.
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穿刺引流治疗18例迟发维生素K缺乏并发颅内出血临床分析
我院于1999年1月-2009年10月对18例因迟发维生素K缺乏并发颅内出血的患儿,在出血倾向缓解后,以CT片定位,行脑血肿穿刺引流术,术后患儿存活率高,远期效果好,后遗症少,具有较高的临床实用性,现报告如下:
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输尿管囊肿的诊断及治疗(附40例报告)
自1990年1月-2002年12月我院共收治输尿管囊肿40例,现报告如下.1 临床资料本组40例,男16例,女24例.年龄13～53岁,平均33岁.囊肿位于左侧16例,右侧20例,双侧4例.
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整体护理在临床上面临的问题
1996年全国卫生工作会议上提出把"以病人为中心"作为我国医院的办院宗旨.之后,我国临床护理工作进行改革,更新了护理观念,打破了长期处于一种以技术操作为主体的护理工作局面,以病人为中心的整体护理工作取得了一定的成效.但是,整体护理在临床应用中,也面临一定的问题,现分析如下.
