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高原现场大鼠肝细胞的体外长期培养

张明森;李素芝;谢刚;杨光;江玉兰

摘要: [目的]在高原环境条件下初步建立体外肝细胞长期培养的一种方法.[方法]将体外分离的大鼠肝细胞以3×105/孔接种于用胶原包被的12孔塑料培养板内,总体培养时间为30d,动态观察培养细胞形态、细胞数量及培养上清中总蛋白、白蛋白和尿素水平变化.[结果]细胞接种4h开始贴壁,8h开始增殖,6d生长满瓶,形成均匀的单层;4d细胞数量明显增多,8d多,达35.2×105/孔,然后细胞数量渐减少;14d培养细胞胞浆内开始出现颗粒状物质和空泡,20d培养细胞开始出现细胞脱壁现象,培养液中漂浮细胞增多;培养上清中总蛋白、白蛋白和尿素水平均呈现显著升高,其达峰值时间分别为10、8和10d,然后渐降低,培养结束时仍然高于培养2d时的水平.[结论]在高原环境条件下,体外长期培养肝细胞生长、增殖及其生物学功能良好,可以应用于高原肝脏生理及病理生理等相关方面的研究.

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