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抗氯霉素单链抗体的高效生产

李黄金;陈伟;赵林;唐伟

摘要: [目的]建立抗氯霉素单链杭体(scFvCAP)的大肠杆菌高效生产体系.[方法]采用重叠延伸PCR法组装scFvCAP,并通过优化5端序列实现高效表达,采用β-环糊精人工伴侣系统实现SDS变性蛋白的复性.[结果]成功组装scFvCAP基因(Genebank ID:GU258048).在强启动子T7驱动下,scFvCAP基因独立表达时未见显著表达,而通过同义突变所得突变基因scFvCAP(Genebank ID:GU258048 )即可高效表达.高效表达所形成的包涵体蛋白可溶于1%SDS-8 mol/L尿素溶液,经β-环糊精人工伴侣系统复性后所获scFvCAP具有与母本单克隆抗体相似的亲和力.[结论]成功建立了基于大肠杆菌基因工程系统的scFvCAP高效生产体系.

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