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人α防御素5(α-HD-5)基因真核表达产物体外抗菌活性的观察

吴学敏;单颖;卢颖

摘要: [目的]为探索HD-5作为抗菌生物制剂替代传统抗生素的研究提供实验依据.[方法]构建毕赤酵母重组表达质粒pGAPZaA-HD5,转化毕赤酵母菌GS115,于Zeocin平板筛选阳性重组菌.振荡培养重组菌约48 h,离心取培养上清原液进行冷冻干燥,再稀释获得含有HD-5的原液(Ⅰ液)、5倍浓缩液(Ⅱ液)和10倍浓缩液(Ⅲ液),以不含HD-5的培养上清(0液)为对照,采用平板打孔药敏法,观察它们对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的抑菌环直径大小.[结果]随着HD-5浓度的逐渐增加,0、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ液对大肠埃希菌的抑菌环直径分别为0mm、(16.56±0.45)mm、(20.09±0.67)mm、(26.72 ±0.54)mm;对金黄色葡萄球菌的抑菌环直径分别为0 mm、(11.45±0.13)mm、(18.09±0.32)mm、(25.50 ±0.21)mm;仅Ⅲ液对铜绿假单胞菌产生了抑菌环[(17.45±0.56)mm].[结论]体外实验证实HD-5的真核表达产物对革兰阳性和革兰阴性细菌有较显著的抑菌作用,提示其作为抗菌生物制剂替代传统抗生素具有潜在的临床应用价值.

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