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聚乙二醇化抗肿瘤坏死因子α抗体的药效学研究

童梅;张宇萌;陆小冬;莫婷;蔡生辉;刘金毅

摘要: 目的:类风湿性关节炎中起关键作用的是肿瘤坏死因子α(TNF-α),抑制TNF-α可以起到控制炎症、阻断病情进展的作用。美国和中国的RA治疗指南都强调了TNF-α抗体的临床应用。该研究设计了一种高效实用的策略以生产新型TNF-αFab'抗体。方法该研究于2015年4月至2016年2月进行。首先采用小型发酵罐对原核工程菌种进行发酵培养,通过萃取、阴离子交换柱净化及亲和层析纯化等方式获得Fab'抗体(TMP5)。下一步进行聚乙二醇化(PEG化)定点修饰及阳离子交换柱纯化得到修饰产物PEG-TMP5,然后进行修饰前和修饰后的抗体亲和力测定和体外中和活性测定。结果 TMP5的产率达23.4 mg/L,通过萃取、净化及亲和层析,研究得到了纯度为96%的抗体。修饰后所得PEG-TMP5和TNF-α抗原有良好的亲和力和活性,亲和力达(6.48±0.86)×10-9 M,活性IC50达(7.58±0.61)×10-11 M,都与阳性对照药赛妥珠单抗相似。结论 PEG-TMP5作为一种新型类风湿性关节炎治疗药物,展示了良好的体外活性和有潜力的应用前景。

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