外周血CD4+ CD8+双阳性T细胞计数增加在肝脏疾病中的回顾性分析
摘要： [目的]通过分析CD4+CD8+(DP)T细胞在肝脏疾病中的病因构成比,探讨DP T细胞在肝脏疾病中的意义.[方法]CD4+CD8+T细胞计数采用流式细胞术方法,使用BD公司Multiset软件测定,回顾性分析我院门诊及住院患者中DP T细胞异常在肝脏疾病中的病因构成.[结果]在71例DPT细胞计数增加的肝脏疾病患者中,前4位的疾病分别是:乙型病毒性肝炎慢性重型、慢性活动性肝炎、肝移植术后和肝炎后肝硬化,分别占26.8%、12.7%、11.3%和9.9%.在感染性疾病和非感染性疾病中分别占70.4%和29.6%.[结论]DP T细胞计数增加在乙型病毒性肝炎慢性重型、慢性活动性肝炎中的比例较高,进一步研究DP T细胞计数增加的机制对于揭示病毒性肝炎的免疫发病机制具有重要意义.
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L-吡咯烷酮酰-4-硝基苯胺的合成及其临床应用
[目的]制备L-吡咯烷酮酰-4-硝基苯胺,用吡咯烷酮芳胺酶(PYRase)法快速检出链球菌等病原菌.[方法]采用L-谷氨酸与水加热生成焦谷氨酸,再与对硝基苯胺反应制得L-吡咯烷酮酰-4-硝基苯胺;将其制成酶底物纸片,对底物浓度、适pH、反应温度及时间进行了探讨,确定了实验的佳条件.[结果]本法底物佳浓度为2 mg/ml,适pH 7.2,反应温度37℃,反应时间10 min.以此条件用自制底物与进口品进行比较其效果完全一致.鉴定了标准菌株9株,临床分离菌株154株.正确率达100%.[结论]本法可代替常规检验方法提前2～3 d报告结果,为链球菌等鉴定提供了一种快速、简便、准确的新方法.
关键词： L-吡咯烷酮酰-4-硝基苯胺 合成 链球菌 鉴定 -
用Advia 120评估ADP对体外血小板的活化作用
[目的]用Bayer Advia 120血细胞分析仪提供的血小板参数平均血小板内含物浓度(mean platelet component concentration,MPC)评价ADP在体外对血小板的活化作用,为研究血小板活化提供实验依据.[方法]取健康献血者抗凝新鲜全血,提取富血小板血浆(PRP),分别以低中高浓度(0.8 μmol/L、4.0 μmol/L、20.0 μmol/L)的ADP作诱导剂,用Bayer Advia 120血细胞分析仪检测MPC随时间变化的关系.[结果]MPC减低存在一定时间依赖关系,初20 min较迅速,在60 min基本达到大活化程度.不同浓度ADP作用结果比较,低中浓度组P值为0.192(P＞0.05),无显著性差异.低高、中高组P值分别为0.008、0.024(P＜0.05),有显著性差异.[结论]ADP诱导血小板MPC减低存在一定的剂量依赖关系,但低、中浓度之间差别不明显,高浓度对血小板的活化作用较低、中浓度强.中、高浓度ADP作用20 min基本可以保证得到活化的血小板,高浓度ADP作用60 min可以得到充分活化活化的血小板.
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宽范围β-HCG双标记液相免疫放射检测方法建立
[目的]研制一种宽范围血清β-HCG液相IRMA检测试剂.[方法]将两株高特异性抗β-HCG单克隆抗体分别标记异硫氰酸荧光素和125I混合作为标记试剂,将待测样品和标记试剂在液相中生成双标记夹心免疫复合物,加入连接抗异硫氰酸荧光素的磁性微粒子分离.[结果]本法小检出值34.42 mIU/ml,标准曲线范围75～7500 mIU/ml,批内和批间CV分别为4.0%和8.8%,回收率在90%～110%,平均为101.7%.[结论]双标记液相IRMA是一种新型检测方法,高检出值7500 mIU/ml是常规高检出值500mIU/ml的15倍,血清高值不必稀释,对临床应用具有简便快速的优点.
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拉米夫定抗乙肝病毒治疗YMDD变异研究
[目的]探讨拉米夫定治疗后乙肝病毒发生YMDD变异情况,及未接受拉米夫定治疗的乙型肝炎患者中是否存在天然变异的情况.[方法]采用聚合酶链式反应(PCR)结合Taqman荧光技术对海南地区110例慢性乙肝患者进行HBV YMDD检测,一组80例接受拉米夫定治疗及保肝治疗,另一组30例为对照组只给予保肝治疗,治疗1年对患者HBV多聚酶基因YMDD基序定性检测,观察是否有突变.[结果]拉米夫定治疗组在用药1年后有31例发生YMDD突变,其中YIDD变异有15例,YVDD变异有7例,YIDD+YVDD变异有9例,变异株中有19例伴HBV DNA、ALT水平高于正常水平;而对照组有11例发生YMDD突变,其中YIDD变异有2例,YVDD变异有1例,YIDD+YVDD变异有8例.[结论]在未经抗病毒治疗的慢性乙肝患者中存在YMDD变异株,临床上在应用拉米夫定对慢性乙型肝炎患者进行抗病毒治疗前,应对患者是否存在YMDD变异加以重视.
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丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂的临床评价
[目的]对研制的丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)ELISA检测试剂进行临床特异性及敏感性评价.[方法]制备抗HCV-核心区(Core)抗原四株单克隆抗体,研制出双抗体夹心检测HCV-core抗原酶联免疫检测(ELISA)试剂.三家临床单位收集抗HCV阴性样品3040份,HBsAg阳性100份,抗HIV阳性40份,从10万份抗-HCV筛查出临界样品28人份.[结果]3040份阴性样品检测有3份HCV-cAg阳性,3份经HCV PCR检测有1份阳性,100份HBsAg阳性,40份抗HIV阳性样本检测均为阴性,在10万份抗HCV抗体筛查样品中,选择28份抗-HCV检测临界样品进行HCV-cAg检测,有4份阳性,4份HCV-cAg阳性样品中有3份HCV-RNA检测阳性.[结论]研制的双抗体夹心HCV-核心抗原ELISA试剂具有很好的特异性和灵敏度.
关键词： 丙型肝炎病毒核心抗原 单克隆抗体 酶联免疫检测试剂 临床评价 -
湖北地区2374例孕中期母血清标志物产前筛查的结果分析
[目的]对湖北地区近3年来孕妇孕中期血清标记物产前筛查数据分析,评价三联筛查实验(AFP+uE3+β-hCG)应用于湖北地区人群的有效性.[方法]应用化学发光法检测孕中期血清标记物AFP、β-hCG、UE3值,应用Risk产前筛查风险分析软件计算风险率,根据随访的结果进行评估.[结果]应用原筛查软件中的各孕周中位值(为白种人群的中位值)作为参考值,唐氏综合征(DS)阳性率为2.72%,高危假阳性率为95.3%;神经管畸形(NTD)阳性率为1.1%,高危假阳性率为26.9%.应用我室回归后的中位值作为参考值重新计算上述孕妇的风险率,DS筛查的高危假阳性率降低,而NTD筛查的结果无显著性差别.[结论]各实验室应建立适用于当地人群分析的孕妇血清标志物浓度中位数数据,减少三联试验筛查DS筛查的假阳性率.
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外周血CD4+ CD8+双阳性T细胞计数增加在肝脏疾病中的回顾性分析
[目的]通过分析CD4+CD8+(DP)T细胞在肝脏疾病中的病因构成比,探讨DP T细胞在肝脏疾病中的意义.[方法]CD4+CD8+T细胞计数采用流式细胞术方法,使用BD公司Multiset软件测定,回顾性分析我院门诊及住院患者中DP T细胞异常在肝脏疾病中的病因构成.[结果]在71例DPT细胞计数增加的肝脏疾病患者中,前4位的疾病分别是:乙型病毒性肝炎慢性重型、慢性活动性肝炎、肝移植术后和肝炎后肝硬化,分别占26.8%、12.7%、11.3%和9.9%.在感染性疾病和非感染性疾病中分别占70.4%和29.6%.[结论]DP T细胞计数增加在乙型病毒性肝炎慢性重型、慢性活动性肝炎中的比例较高,进一步研究DP T细胞计数增加的机制对于揭示病毒性肝炎的免疫发病机制具有重要意义.
关键词： CD4+CD8+T细胞 流式细胞术 肝脏疾病 -
2型糖尿病大鼠GLUT4mRNA表达与胰岛素分泌关系的探讨
[目的]探讨2型糖尿病大鼠GLUT4mRNA表达与胰岛素分泌的关系,进一步阐明胰岛素抵抗发病机制.[方法]采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),分析大鼠骨骼肌、心肌和脂肪组织中GLUT4mRNA表达,放射免疫方法测定血清胰岛素含量.[结果]2型糖尿病大鼠骨骼肌、心肌和脂肪组织中GLUT4mRNA表达比正常对照组相对应组织中的表达低,其基础胰岛素、口服葡萄糖后胰岛素水平比正常对照组显著降低.[结论]2型糖尿病大鼠胰岛素分泌量与组织中GLUT4mRNA表达具有一致性表型.
关键词： 葡萄糖转运体4(GLUT4) 胰岛素分泌 2型糖尿病 -
时间分辨荧光免疫分析法乙型肝炎血清标志物分析灵敏度的建立与分析
[目的]乙型肝炎表面抗原和表面抗体定量测定试剂盒.[方法]时间分辨荧光免疫分析法的分析灵敏度进行建立与分析,以便更好的指导临床诊断和进行流行病学研究.[结果]通过实验研究,乙型肝炎病毒表面抗原定量检测试剂盒和表面抗体定量检测试剂盒的检测低限分别为0.0356 ng/ml和0.548 mIU/ml,生物检测限分别为0.200 ng/ml和5.00mIU/ml,功能灵敏度分别为0.200 ng/ml和5.00mIU/ml,线性范围分别为0.200ng/ml～300ng/ml和5.00mIU/ml～1200 mIU/ml,并达到中国药品生物制品检定所检定要求.[结论]时间分辨荧光免疫分析法乙型肝炎病毒定量检测试剂盒具有灵敏度高,线性范围宽,特异性强的特点,已能有效应用于临床体外诊断和流行病学研究.
关键词： 时间分辨荧光免疫分析 乙型肝炎 标志物 分析灵敏 -
ACE基因多态性及线粒体5178A/C基因型与心肌梗死的关系研究
[目的]探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多态性及线粒体(mt)5178A/C基因型与心肌梗死的关系.[方法]采用PCR法检测心肌梗死患者84例及正常对照80例的ACE I/D多态性.采用PCR-RFLP方法检测心肌梗死患者84例及正常对照者80例的mt5178A/C基因型.并对结果进行统计学分析.[结果]在心肌梗死患者中,ACE基因的DD基因型频率及D等位基因频率显著高于正常对照组(均P＜0.05),DD与非DD及D与I的比数比(OR)分别为2.443(1.265-4.716)及1.703(1.098-2.638).mt5178C等位基因频率也明显高于正常对照组(P=0.021),mt5178C与mt5178A的比数比为2.254(1.114-4.563).[结论]ACE基因DD基因型及mt5178C与心肌梗死有关,可能是发生心肌梗死的重要危险因素.
