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疏风宣肺方和解表清里方对流感病毒 H1 N1感染人肺腺癌上皮细胞 A549中 TLR3/7信号通路作用的研究

葛世杰;卢娜娜;刘晓婷;张沂;顾立刚;吴珺;邱泽计;张洪春;晁恩祥

摘要: 目的:研究疏风宣肺方和解表清里方体外对人肺腺癌上皮细胞A549中TLR3/7信号通路的影响。方法:利用基因芯片技术研究甲型流感病毒H1 N1感染A549细胞后TLR3/7信号通路中基因转录的变化。采用荧光定量PCR和Western blotting法检测各组细胞中的Toll样受体3( Toll-like receptor 3,TLR3)、Toll样受体7(Toll-like receptor 7,TLR7)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)、激活核因子 Kappa B( nuclear factor-Kappa B,NF-κB)的mRNA及蛋白表达的变化。结果:在TLR3/7相关信号传导通路中,与细胞对照组相比,H1N1感染组差异表达基因Tlr3、Tlr7、Myd88、Nf-bk1、Mapk8、Mapk13、Ifna1、Ifnβ1明显上调,奥司他韦组、疏风宣肺组和解表清里组对差异表达基因Tlr3、Tlr7、Myd88、Nfbk1、Mapk8、Mapk13、Ifna1、Ifnβ1明显下调。 qRT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H1N1感染组TLR3/7、MyD88、NF-κB的mRNA表达均显著升高( P<0.01)。与H1N1感染组比较,疏风宣肺组的TLR3/7、MyD88、NF-κB的mRNA表达均明显降低( P<0.05或P<0.01),解表清里方对TLR3/7、NF-κB的mRNA表达均明显降低( P<0.05或P<0.01)。同时,疏风宣肺组治疗效果优于解表清里组。 Western blotting结果显示, H1 N1感染组TLR3/7、NF-κB 蛋白较正常组显著升高(P<0.05)。与H1N1感染组比较,两种方药的TLR3/7、NF-κB表达均显著降低( P<0.05或P<0.01)。结论:疏风宣肺方和解表清里方可以抑制流感病毒H1 N1所诱导的TLR3/7信号通路活化,下调活性NF-κB的转录活性,发挥抗流感病毒的作用。

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