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平肺复方对人肺腺癌 A549细胞 PPAR-γ信号通路的影响
目的：研究平肺复方对人肺腺癌A549细胞增殖及过氧化物酶体增长因子活化受体（ peroxisome proliferators-activated receptor ， PPAR）-γ信号通路的影响。方法运用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8，CCK-8）比色法检测平肺复方对人肺腺癌A549细胞增殖的影响，并添加PPAR-γ特异性阻断剂GW9662，观察PPAR-γ通路阻断后平肺复方对A549细胞生长的影响。结果平肺复方生药5 mg/ml和10 mg/ml在作用24小时、48小时和72小时表现出对A549细胞增殖的抑制作用（ P＜0.05）；单纯加入GW9662对细胞的生长并未产生影响；加入GW9662的平肺复方仍可对细胞生长产生抑制作用（P＜0.05），但这种抑制作用明显弱于平肺复方（P＜0.05）。结论平肺复方的抗肿瘤作用机制可能部分涉及到PPAR-γ信号通路，但并不完全是通过这一条信号通路在发挥作用。
关键词： 平肺复方 PPAR-γ信号通路 人肺腺癌A549细胞 -
二冬膏抗NF-κB抑制介导的人肺癌细胞效应探讨
目的:探讨二冬膏的抗肿瘤效应,并研究核转录因子κB(NF-κB)在二冬膏抗肿瘤效应中的作用.方法:用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测二冬膏对A549细胞的增殖抑制效应(量效和时效关系);逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测二冬膏对A549细胞p65 mRNA表达的影响;采用免疫印迹法(Western blot)检测二冬膏对A549细胞p65蛋白表达的影响.结果:不同剂量组二冬膏含药血清均具有对肺腺癌A549细胞的明显增殖抑制作用(P＜0.05),且各自表现出一定时间和剂量相关性,给药干预24 h后细胞增殖均出现抑制,其中以二冬膏中剂量组(3.2 g·kg-1,bid)干预48 h后对细胞增殖的抑制作用明显.二冬膏中剂量组(3.2 g·kg-1,bid)干预A549细胞24 h后明显抑制p65 mRNA的表达;中剂量组(3.2 g·kg-1,bid)干预A549细胞后48 h对p65蛋白有显著抑制效应.结论:二冬膏可显著抑制人肺腺癌细胞系A549的增殖,通过对NF-κB的抑制介导其抗肿瘤活性.
关键词： 二冬膏 人肺腺癌A549细胞 核转录因子κB -
平肺浸膏对人肺腺癌A549细胞的杀伤作用
目的:研究中药复方平肺浸膏对人肺腺癌A549细胞增殖的影响及诱导细胞凋亡的作用.方法:采用CCK-8比色法和磷脂酰丝氨酸外翻分析法分别检测平肺浸膏对人肺腺癌A549细胞增殖和细胞凋亡的作用.平肺浸膏(1 g·mL-1)由中日友好医院药学部提供,实验前经定性滤纸粗滤,0.22μm滤膜过滤后分装.人肺腺癌A549细胞常规复苏、培养及传代,处于对数生长期开始用于实验.实验分为空白对照、生药终浓度1,5,10 g·L-1共4组.细胞以7×104/mL接种于96孔培养板,24 h细胞贴壁后加不同浓度平肺浸膏,对照组只换液不加药.分别于加药后24,48,72 h用CCK-8法检测细胞增殖情况.将细胞以3×104/mL接种于6孔培养板,5h细胞贴壁后加不同浓度的平肺浸膏.药物作用17 h后收获细胞,应用磷脂酰丝氨酸外翻分析法,于流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:平肺浸膏生药5,10 g·L-1在体外作用24 h以上表现出对A549细胞增殖的抑制作用,与常规对照组相比存在统计学差异(P＜0.05),且这种抑制作用随时间和药物浓度增加而增强.生药10 g·L-1可诱导早期细胞凋亡,与常规对照组相比存在统计学意义(P＜0.05).结论:中药复方平肺浸膏能够抑制人肺腺癌细胞A549的增殖,诱导细胞凋亡.
关键词： 中药复方 人肺腺癌A549细胞 细胞凋亡 平肺浸膏 -
麦门冬汤诱导人肺腺癌A549细胞凋亡作用及其机制
目的:研究麦门冬汤对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响.方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测麦门冬汤(0.25、2.5、25g/L)作用24、48、72h后人肺腺癌A549细胞(2×104个/mL)活性;吖啶橙(AO)/EB双荧光染色观察麦门冬汤各剂量作用48h后A549细胞凋亡形态学改变;流式细胞术分析麦门冬汤作用48h后A549细胞凋亡率;Western Blot检测麦门冬汤对凋亡相关蛋白表皮生长因子受体(EGFR)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)表达的影响.结果:各剂量麦门冬汤能够抑制A549细胞活性,诱导其发生凋亡形态学改变,且A549细胞凋亡率与麦门冬汤剂量呈正相关(P＜0.01);Western Blot检测表明低、中剂量麦门冬汤可使EGFR、STAT3表达下降.结论:麦门冬汤可诱导A549细胞凋亡,其作用机制可能与下调EGFR、STAT3蛋白表达相关.
关键词： 麦门冬汤 人肺腺癌A549细胞 凋亡 表皮生长因子受体 信号转导子和转录激活子3 -
鸡血藤黄酮类有效部位通过CKI途径对人肺腺癌细胞A549细胞周期的影响
目的:从细胞周期蛋白激酶抑制因子(CKI)途径入手探讨鸡血藤黄酮类有效部位(SSCE)对人肺癌A549细胞的周期阻滞作用的分子机制.方法:采用RT-PCR法检测人肺腺癌A549细胞中p21、p27 mRNA表达;应用Western Blotting法测定人肺腺癌A549细胞中p21、p27蛋白表达.结果:160mg/L SSCE作用于人肺腺癌A549细胞24h后,细胞内p21 mRNA表达较对照组增加(P＜0.01);p21蛋白含量较对照组高(P＜0.01),而细胞内p27 mRNA表达及蛋白含量与对照组比较差异无统计学意义;160mg/L SSCE作用人肺腺癌A549细胞48h后,细胞内p21、p27 mRNA表达与对照组比较差异无统计学意义;细胞内p21、p27蛋白含量与对照组比较差异无统计学意义.结论:SSCE上调p21 mRNA转录水平及蛋白表达量是引起人肺腺癌A549细胞G2/M期细胞周期阻滞的机制之一;p21、p27对SSCE引起的人肺腺癌A549细胞G0/G1期阻滞无直接作用.
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流感病毒H1N1感染A549细胞诱导炎性因子表达及黄芩苷调控作用的研究
目的:探讨流感病毒H1N1体外感染细胞诱导炎性因子表达及黄芩苷调控作用的研究.方法:正常生长细胞接种100 TCID50的病毒液;吸附2h后加入黄芩苷高剂量组(3.96μg/mL)和黄芩苷低剂量组(0.99μg/mL),以奥司他韦(0.75μg/mL)做阳性对照.采用基因芯片技术分析各组细胞差异表达炎性因子.以RT-PCR和Westernblotting法检测细胞内靶因子mRNA和蛋白的表达变化.结果:与细胞对照组相比,H1N1感染组差异表达基因IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α和RANTES明显上调(P＜0.01);给药后上述因子表达下调,部分IL-10明显上调(P＜0.05,P＜0.01).Western blotting和RT-PCR检验结果与基因芯片结果相符合.结论:流感病毒H1N1感染后诱导炎性因子过度表达损伤细胞,黄芩苷可以调控炎性因子表达,减轻宿主细胞的损伤作用,具有明显的抗感染在用.
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川芎嗪对甲型流感病毒H1N1诱导炎性细胞因子分泌作用的研究
目的:研究川芎嗪(TMP)对甲型流感病毒H1N1感染的人肺腺癌上皮细胞(A549)中炎性细胞因子的影响.方法:培养A549细胞,甲型流感病毒H1N1感染A549后,分为细胞对照(N)组、H1V1感染(M)组、奥司他韦对照(D)组,TMP高剂量(S)组及TMP低剂量(J)组.采用RT-PCR和Western blotting法检测各组细胞中IL-1β、IL-10、INF-γ、TNF-α mRNA及蛋白表达.结果:与N组比较,M组IL-1β、IL-10、TNF-αmRNA表达显著升高,而INF-γ mRNA表达显著降低(P＜0.01);与M组比较,D、S、J组IL-1β、IL-10、TNF-α mRNA表达均明显降低(P＜0.01).M组IL-1β、IL-10、INF-γ和TNF-α蛋白表达较N组显著升高(P＜o.05);与M组比较,S、J组IL-1β、IL-10、INF-γ和TNF-α均显著降低(P＜0.05,P＜0.01).结论:TMP可抑制流感病毒感染后炎性细胞因子IL-1β、IL-10、INF-γ和TNF-αmRNA表达及蛋白分泌,减轻炎性反应,并恢复机体免疫功能的稳定和平衡.
关键词： 川芎嗪 甲型流感病毒H1N1 炎性细胞因子 人肺腺癌A549细胞 -
S型与R型人参皂苷Rh2对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响
目的:探讨人参皂苷Rh2(S型与R型)对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,以阐述人参活性成分抗肿瘤活性的构效关系及可能机制.方法:采用MTT实验测定细胞增殖;碘化丙啶(PI)单染流式细胞仪分析细胞周期中各时期的细胞百分数,观察人参皂苷Rh2对人肺腺癌A549细胞增殖周期的影响.AnnexinV-PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,采用免疫荧光实验对作为细胞凋亡标志的Caspase-3活性进行测定.结果:人参皂苷Rh2对人肺腺癌A549细胞毒活性明显存在构效关系,其中25 mg·L-1的20(R)-人参皂苷Rh2和20(S)-人参皂苷Rh2作用48 h对肿瘤细胞株A549的增殖抑制率分别为28.5%,33.6%,IC50值分别为33.4,28.5 mg·L-1.20 mg·L-1的20(S)-人参皂苷Rh2作用A549细胞24 h后g0/G1期细胞比例显著高于对照组(P＜0.01),S期细胞比例显著低于对照组(P＜0.01),G2/M期细胞比例与对照组比较无显著性差异,说明20(S)-人参皂苷Rh2能阻滞细胞周期于G1期.30 mg·L-1的S型和R型人参皂苷Rh2作用A549细胞24 h后,无论是早期还是晚期凋亡率均明显高于正常组细胞(P＜0.05),并且20(S)-人参皂苷Rh2组早期凋亡率明显高于20(R)-人参皂苷Rh2组,表现出明显的构效效应(P＜0.05).20(R)-人参皂苷Rh2和20(S)-人参皂苷Rh2作用6 h的A549细胞中标记Caspase-3活性的荧光亮度明显增强,说明Caspase-3的激活参与了人参皂苷Rh2诱导的A549细胞凋亡.结论:S型和R型人参皂苷Rh2均可剂量依赖性地抑制A549细胞增殖,并且20(S)-人参皂苷Rh,的抗肿瘤活性明显强于20(R)-人参皂苷Rh2,阻滞细胞周期于G1期,具有构效效应;S型和R型人参皂苷Rh2均具有促进A549细胞凋亡作用,并且20(S)-人参皂苷Rh2组早期凋亡率明显高于20(R)-人参皂苷Rh2组,具有构效效应.
关键词： 人参皂苷rh2 人肺腺癌A549细胞 细胞周期 凋亡 -
靶细胞捕集及超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱质谱法分析预测姜黄中抗肺癌活性成分
该文建立了基于人肺腺癌A549细胞和超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱质谱(UHPLC/LTQ Orbitrap MS)的靶细胞捕集-化学表征技术,用于分析预测姜黄中抗肺癌的潜在活性成分.将A549靶细胞和姜黄提取物一起孵育培养,根据活性成分可以与靶细胞膜有特异性结合或者进入靶细胞内的原理,用液质联用方法可对培养后的细胞结合成分进行分析.因姜黄中的主要活性成分为脂溶性成分,在与A549细胞共同孵育时出现吸附于培养瓶内壁的现象,造成空白溶液有干扰.该文通过细胞消化后多次离心和转移,解决了空白干扰问题,成功从姜黄提取物中筛选出3个与A549细胞结合的成分,经鉴定,分别为双脱甲氧基姜黄素、脱甲氧基姜黄素和姜黄素,系姜黄中主要的抗肺癌活性成分.该文结果表明通过改进的方法,可以解决脂溶性成分因吸附瓶壁而造成假阳性的情况,是对现有靶细胞捕集-化学表征技术的有力补充.
关键词： 靶细胞捕集-化学表征 人肺腺癌A549细胞 液质联用法 静电场轨道阱质谱 姜黄 活性成分 -
端锚酶和端粒酶反义寡核苷酸联合作用对人肺腺癌细胞 A549 端粒的影响
目的 探讨端锚酶及端粒酶反义寡核苷酸联合作用对A549细胞端粒相关蛋白表达和翻译及对端粒缩短和细胞周期的作用.方法 将A549细胞随机分组为空白对照、sTANKS、shTERT、asTANKS、ashTERT 和 asTANKS+ashTERT组,经不同处理,检测 hTERT mRNA、端粒酶及端锚酶活性、端粒平均长度及A549 细胞寿命.结果 ashTERT能抑制hTERT mRNA表达及蛋白质活性;asTANKS不影响hTERT mRNA表达,却能抑制端锚酶活性.asTANKS或ashTERT均可致A549端粒长度缩短,asTANKS+ashTERT则缩短更为明显,其减少A549细胞平均传代数的作用也明显大于asTANKS或ashTERT.结论 asTANKS对A549端粒长度的抑制有别于端粒酶途径,不仅能通过影响端锚酶活性缩短肿瘤细胞 A549 端粒的平均长度,而且可与端粒酶抑制剂协同作用明显缩短肿瘤细胞的生存周期,这可能成为抗癌作用的新靶点.
关键词： 端粒长度 端锚酶 端粒酶 反义寡核苷酸 人肺腺癌A549细胞 -
香烟烟雾对2种肺细胞的DNA损伤与修复
目的探讨经香烟烟雾溶液染毒的人正常肺间质细胞和人肺腺癌细胞的DNA损伤及其修复效应.方法体外培养人胚肺成纤维细胞(HLF)和人肺腺癌A549细胞,以二甲基亚砜(DMSO)和磷酸缓冲液(PBS)作为吸收液,采集香烟主流烟雾.用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定香烟烟雾-DMSO吸收液和香烟烟雾-PBS吸收液(分别简称DMSO烟液和PBS烟液)的1/2、1/4、1/8和1/16倍稀释液和原液对HLF细胞和A549细胞的毒性(分别以DMSO和PBS为阴性对照),以无明显细胞毒性的浓度进行彗星实验(分别以DMSO和PBS为阴性对照,以重铬酸钾为阳性对照),测定细胞的DNA损伤及修复情况.结果DMSO烟液原液及其1/2稀释液染毒的细胞存活率低于80%,而PBS烟液染毒的细胞存活率均高于80%.DMSO烟液的1/4、1/8、1/16倍稀释液以及PBS烟液的1/2、1/4、1/8和1/16倍稀释液和原液对HLF细胞和A549细胞的DNA损伤与阴性对照组相比,差异均具有统计学意义(P＜0.01),且存在明显的剂量-效应关系.DNA损伤在两种细胞间差异无统计学意义(P＞0.05),但DMSO烟液所致的DNA损伤高于PBS烟液(P＜0.01).细胞在去除受试物后培养30 min时开始修复,随着修复时间的延长,拖尾细胞数减少,DNA迁移长度缩短(P＜0.05),且A549细胞修复得更快(P＜0.05).结论DMSO烟液的细胞毒性和遗传毒性均高于PBS烟液.香烟烟雾对HLF细胞和A549细胞的DNA损伤差异不明显,A549细胞的DNA损伤修复能力较HLF细胞强.
关键词： 烟草烟污染 DNA损伤 彗星实验 人胚肺成纤维细胞 人肺腺癌A549细胞 -
小檗胺对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及其机制研究
目的 研究小檗胺体外对人肺腺癌A549细胞凋亡及TNF-α-JNK信号通路的影响.方法 MTT比色法检测小檗胺对A549细胞增殖的影响;显微镜观察A549细胞形态变化;Annexin V/PI双标法检测细胞的凋亡率;Western blotting法检测细胞凋亡标记蛋白Bcl-x、Caspase-3和PARP表达的变化,c-jun氨基末端激酶(JNK)的蛋白表达及其磷酸化表达水平;荧光定量PCR和ELISA检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的变化;通过JNK通路抑制剂进一步验证TNF-α-JNK信号通路在小檗胺药效中的作用.结果小檗胺能够显著抑制A549细胞增殖,并呈浓度相关性,小檗胺给药后24 h的IC50值为9.01 μmol/L;经小檗胺处理后,A549细胞可见典型的凋亡形态学改变,Annexin V/PI双标法检测结果也显示小檗胺可诱导A549细胞凋亡,小檗胺10 μmol/L组细胞早期凋亡率为13.8％,为对照组的6.6倍;小檗胺可显著降低抗凋亡蛋白Bcl-x的表达,明显增强促凋亡蛋白Caspase-3和PARP的活性,显著提高TNF-α基因和蛋白表达及JNK蛋白的磷酸化表达水平,激活TNF-α-JNK通路.结论小檗胺能抑制A549细胞的增殖,诱导其凋亡,其作用机制可能与TNF-α-JNK信号通路的激活有关.
关键词： 小檗胺 人肺腺癌A549细胞 细胞增殖 细胞凋亡 TNF-α-JNK通路 -
厄洛替尼联合survivin siRNA对人肺腺癌细胞A549增殖的影响
目的:探讨厄洛替尼联合survivin siRNA对人肺腺癌细胞A549的作用.方法:survivin siRNA转染、厄洛替尼单独或联合应用于人肺腺癌细胞A549,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察对A549细胞的增殖抑制作用,免疫组化染色法观察A549细胞Survivin蛋白的表达情况.结果:survivin siRNA转染联合厄洛替尼对A549细胞具有明显的抑制作用,且可明显降低A549细胞Survivin蛋白的表达,与单独应用survivin siRNA转染和厄洛替尼比较均有统计学意义(P<0.01).结论:应用siRNA沉默survivin表达可提高人肺腺癌细胞A549对厄洛替尼的敏感性.
关键词： 厄洛替尼 Survivin siRNA 人肺腺癌A549细胞 -
β-榄香烯联合高温对肺腺癌A549细胞作用的实验研究
目的:观察榄香烯联合高温对人肺腺癌A549细胞的协同杀伤作用.方法:用MTT法检测高温处理或常温处理细胞对榄香烯的敏感性.采用15μg/mL榄香烯或60μg/mL榄香烯联合42℃高温处理1.5h或常温处理,使用流式细胞仪检测细胞周期,透射电镜观察细胞形态学改变.结果:高温作用后,榄香烯对A549细胞的IC50从35.43 μg/mL降低至28.68 μg/mL; MTT法检测显示低浓度榄香烯联合高温对A549细胞具有明显的协同杀伤作用,细胞呈现凋亡形态,可见凋亡小体,同时有细胞坏死.结论:低浓度榄香烯联合高温对A549细胞有协同细胞毒效应.
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RNA干扰介导ABCE1基因沉默对人肺腺癌A549细胞增殖的影响
目的 ABCE1在人肺腺癌A549细胞增殖中的作用进行初步探讨.方法 以人肺腺癌A549细胞系为研究对象,针对其ABCE1基因序列设计小干扰RNA片段,重组其短发夹状RNA(shRNA)表达载体,转染入细胞.用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blot)方法分别检测转染后ABCE1的mRNA和蛋白的表达水平,MTT法检测增殖能力.结果 RT-PCR和Western blot显示shRNA对ABCE1基因和蛋白水平均有显著的下调作用.人肺腺癌A549细胞的生长速度减慢.结论 下调ABCE1基因后,A549细胞的增殖能力得到了明显的抑制,有可能成为临床治疗A549的靶点之一.
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槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响
目的 探讨槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖抑制及诱导凋亡的影响.方法 制备不同浓度的槐耳清膏(0、3、6、9 mg/ml)和羟基喜树碱100 μg/ml作用于A549细胞,分别于24、36和48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 槐耳清膏与羟基喜树碱均可诱导A549细胞凋亡,槐耳清膏各浓度组与阴性对照组相比差异显著(P<0.05),且这种抑制存在浓度和时间依赖性,槐耳清膏浓度在3.0 mg/ml 36 h后抑制作用强,羟基喜树碱组与之比较无显著差异(P>0.05),各浓度槐耳清膏组在与A549细胞作用36 h后达到抑制高峰.结论 槐耳清膏在体外能抑制人肺腺癌细胞A549的增殖,诱导细胞凋亡作用.
关键词： 槐耳清膏 人肺腺癌A549细胞 增殖 凋亡 -
Wnt5a对人肺腺癌A549细胞凋亡的调控作用及其机制
目的:探讨 Wnt5a对人肺腺癌 A549细胞株凋亡的调控作用,并阐明其机制.方法:选择人肺腺癌A549细胞,采用Wnt5a处理的A549细胞作为处理组,以C培养液处理的A549细胞作为对照组,采用TUNEL染色法检测 Wnt5a诱导的 A549细胞凋亡小体,Annexin V-FITC/PI双标法检测2组 A549细胞凋亡率,采用DCFH-DA荧光探针法检测2组 A549细胞活性氧(ROS)水平,采用JC-1染色法检测2组 A549细胞线粒体跨膜电位水平,蛋白免疫印迹法检测2组 A549细胞中凋亡相关蛋白表达水平.结果:与对照组比较,处理组A549细胞在处理12、24和48 h后细胞凋亡率明显升高(P<0.01),ROS水平升高(P<0.05),线粒体膜电位水平下降(P<0.05),促凋亡蛋白BAX的表达量上调,AIF蛋白表达量下调.结论:Wnt5a对人肺腺癌细胞凋亡具有调控作用,其通过线粒体凋亡途径发挥诱导细胞凋亡作用.
关键词： Wnt5a 人肺腺癌A549细胞 细胞凋亡 活性氧 线粒体膜 -
IL-24抑癌基因联合大蒜素对肺癌细胞的杀伤作用
目的 探讨IL-24基因联合大蒜素对肺癌A549细胞的增殖抑制和促凋亡作用. 方法 提取前期构建的pDC316-hIL-24-EGFP质粒,转染肺癌A549细胞,分为A组:空白对照组;B组:单独大蒜素组;C组:脂质体+IL-24组;D组:大蒜素+脂质体+IL-24. 荧光显微镜下观察质粒的转染情况,结晶紫染色法和MTT法检测pDC316-hIL-24-EGFP联合大蒜素对肺癌A549细胞生长的影响,用流式细胞仪检测细胞凋亡. 结果 40、80 mg/L大蒜素和pDC316-hIL-24-EGFP单用24、48 h对A549细胞均有明显抑制作用,呈剂量依赖性. 低剂量大蒜素(40 mg/L)联合pDC316-hIL-24-EGFP比单用pDC316-hIL-24-EGFP作用更强(P<0. 05). 40 mg/L大蒜素、pDC316-hIL-24-EGFP和两药联用48 h,A549细胞凋亡率分别为32. 7%,39. 4%和68. 8%. 结论 pDC316-hIL-24-EGFP联合大蒜素对人肺癌A549细胞有协同抑制作用.
关键词： IL-24基因 大蒜素 联合用药 人肺腺癌A549细胞 -
疏风宣肺方和解表清里方对流感病毒 H1 N1感染人肺腺癌上皮细胞 A549中 TLR3／7信号通路作用的研究
目的：研究疏风宣肺方和解表清里方体外对人肺腺癌上皮细胞A549中TLR3／7信号通路的影响。方法：利用基因芯片技术研究甲型流感病毒H1 N1感染A549细胞后TLR3／7信号通路中基因转录的变化。采用荧光定量PCR和Western blotting法检测各组细胞中的Toll样受体3（ Toll－like receptor 3，TLR3）、Toll样受体7（Toll－like receptor 7，TLR7）、髓样分化因子88（myeloid differentiation factor 88， MyD88）、激活核因子 Kappa B（ nuclear factor－Kappa B，NF－κB）的mRNA及蛋白表达的变化。结果：在TLR3／7相关信号传导通路中，与细胞对照组相比，H1N1感染组差异表达基因Tlr3、Tlr7、Myd88、Nf-bk1、Mapk8、Mapk13、Ifna1、Ifnβ1明显上调，奥司他韦组、疏风宣肺组和解表清里组对差异表达基因Tlr3、Tlr7、Myd88、Nfbk1、Mapk8、Mapk13、Ifna1、Ifnβ1明显下调。 qRT－PCR结果显示，与细胞对照组比较，H1N1感染组TLR3／7、MyD88、NF－κB的mRNA表达均显著升高（ P＜0．01）。与H1N1感染组比较，疏风宣肺组的TLR3／7、MyD88、NF－κB的mRNA表达均明显降低（ P＜0．05或P＜0．01），解表清里方对TLR3／7、NF－κB的mRNA表达均明显降低（ P＜0．05或P＜0．01）。同时，疏风宣肺组治疗效果优于解表清里组。 Western blotting结果显示， H1 N1感染组TLR3／7、NF－κB 蛋白较正常组显著升高（P＜0．05）。与H1N1感染组比较，两种方药的TLR3／7、NF－κB表达均显著降低（ P＜0．05或P＜0.01）。结论：疏风宣肺方和解表清里方可以抑制流感病毒H1 N1所诱导的TLR3／7信号通路活化，下调活性NF－κB的转录活性，发挥抗流感病毒的作用。
关键词： 疏风宣肺方 解表清里方 流感病毒 人肺腺癌A549细胞 TLR3/7信号通路 -
黄芪总苷对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响
目的:研究黄芪总苷(TA)对人肺腺癌A549细胞增值及凋亡的影响.方法:采用不同药物浓度作用于人肺腺癌A549细胞,应用MTT、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术分析药物对细胞的影响.结果:TA对A549细胞有明显的生长抑制及凋亡作用,并呈剂量、时间依赖性.DNA凝胶电泳显示出特征性凋亡梯状带.结论:在一定条件下,TA可抑制人肺腺癌细胞增殖,抑制作用具有明显的浓度和时间依赖性,同时可诱导其凋亡,凋亡可能与细胞周期阻滞有关.
关键词： 黄芪总苷 人肺腺癌A549细胞 增殖 凋亡
