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右归丸对肾阳虚高脂血症大鼠JAK/STATs通路的实验探讨
目的:通过大剂量肌注氢化可的松复制肾阳虚高脂血症大鼠模型,并给予右归丸干预,观察右归丸对于模型大鼠酪氨酸蛋白激酶2(JAK2),信号转导子和转录激活子3(STAT3)和肝X受体α(LXRα)蛋白和基因表达的影响,探讨JAK2/STAT3信号转导通路与肾阳虚大鼠血脂异常的相关性.方法:SD大鼠60只分为正常组、模型组、右归丸组(2.43 g·kg-1),利用大剂量im氢化可的松制作肾阳虚大鼠模型,正常组不造模,模型组造模并给予生理盐水,右归丸组造模给予右归丸混悬液ig,检测血清脂类物质甘油三脂(TG),胆固醇(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,免疫组化检测肝组织LXRα蛋白表达,RT-PCR检测实验大鼠肝组织JAK2,STAT3和LXRα基因的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中TG,TC,LDL-C含量显著升高(P＜0.01),HDL-C含量显著降低(P＜0.01);与模型组比较,右归丸组大鼠血清中TG,TC,LDL-C含量显著下降(P＜0.01),HDL-C含量显著升高(P＜0.01).与正常组比较,模型组肾阳虚高脂血症大鼠肝内LXRα蛋白表达明显增加(P＜0.05),JAK2,STAT3和LXRα基因表达增加(P＜0.05);与模型组比较,右归丸组大鼠肝内LXRα蛋白表达明显减少(P＜0.05),JAK2,STAT3和LXRα基因表达减少(P＜0.05).结论:肌注氢化可的松制造的肾阳虚高脂血症模型可能是通过上调了JAK2/STAT3信号转导通路中的JAK2,STAT3和LXRα蛋白和基因而影响了血液中甘油三酯和胆固醇的代谢,右归丸可能通过抑制JAK2/STAT3信号转导通路中相关细胞因子蛋白和基因的表达来降低模型大鼠血液中脂类的含量.
关键词： 酪氨酸蛋白激酶2 信号转导子和转录激活子3 肝X受体α 高脂血症 右归丸 -
麦门冬汤诱导人肺腺癌A549细胞凋亡作用及其机制
目的:研究麦门冬汤对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响.方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测麦门冬汤(0.25、2.5、25g/L)作用24、48、72h后人肺腺癌A549细胞(2×104个/mL)活性;吖啶橙(AO)/EB双荧光染色观察麦门冬汤各剂量作用48h后A549细胞凋亡形态学改变;流式细胞术分析麦门冬汤作用48h后A549细胞凋亡率;Western Blot检测麦门冬汤对凋亡相关蛋白表皮生长因子受体(EGFR)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)表达的影响.结果:各剂量麦门冬汤能够抑制A549细胞活性,诱导其发生凋亡形态学改变,且A549细胞凋亡率与麦门冬汤剂量呈正相关(P＜0.01);Western Blot检测表明低、中剂量麦门冬汤可使EGFR、STAT3表达下降.结论:麦门冬汤可诱导A549细胞凋亡,其作用机制可能与下调EGFR、STAT3蛋白表达相关.
关键词： 麦门冬汤 人肺腺癌A549细胞 凋亡 表皮生长因子受体 信号转导子和转录激活子3 -
周围神经再生时重组CNTF对受损神经元 STAT3表达和酪氨酸磷酸化的作用
目的研究周围神经再生时,重组睫状神经营养因子(CNTF)对受损神经元JAK-STAT途径和酪氨酸磷酸化的作用.方法用硅管套接切断的成年大鼠坐骨神经,术时在受损神经局部给予重组CNTF,用免疫组织化学ABC法结合计算机图像分析研究STAT3、磷酸化酪氨酸(PTyr)免疫反应阳性物质在L3～5段脊髓前角外侧核和L5脊神经节神经元中的分布和相对含量.结果与生理盐水组相比,CNTF组脊髓前角外侧核神经元胞核STAT3和胞膜PTyr阳性物质的含量更高,脊神经节神经元胞浆和胞核PTyr阳性物质的含量更高.结论重组CNTF能激活和强化受损运动神经元的JAK-STAT途径,增强受损神经元的酪氨酸磷酸化.
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氯沙坦对糖尿病大鼠肾小球信号蛋白JAK2和STAT3表达的影响
目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂氯沙坦对糖尿病大鼠肾小球信号蛋白Janus酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)与信号转导子和转录激活子3(STAT3)表达的影响.方法雄性Wistar大鼠60只,随机分为正常对照组、糖尿病组和氯沙坦治疗组.腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病大鼠模型,每日灌胃氯沙坦10 mg/kg.采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测肾小球细胞JAK2、STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白的表达,免疫沉淀和Western blot检测磷酸化JAK2(p-JAK2)情况,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾小球细胞JAK2和STAT3 mRNA的表达.结果在2周和4周时,糖尿病组较对照组肾小球JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白及其JAK2和STAT3 mRNA表达明显增强(P均<0.01).氯沙坦治疗组较糖尿病组p-JAK2和p-STAT3表达降低(P<0.05).氯沙坦对JAK2和STAT3蛋白及其mRNA的表达无明显影响.结论 JAK2和STAT3信号蛋白可能参与了糖尿病早期肾脏的发病过程,氯沙坦对肾脏保护作用可能部分是通过影响JAK/STAT信号途径的激活而实现的.
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间充质干细胞调控信号转导因子与转录激活因子3下调小鼠胆管上皮细胞自噬治疗原发性胆汁性肝硬化
目的 探讨PBC小鼠肝内胆管上皮细胞自噬的异常及脐带MSCs(UC-MSCs)对自噬的影响和治疗PBC小鼠的机制.方法 诱导小鼠PBC模型后,随机分为PBC组、MSCs组和Stattic组(信号转导因子和转录激活因子3拮抗剂组,STAT3拮抗剂组),另取对照组.检测小鼠肝脏病理及血清抗丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位(PDG-E2)抗体水平;电镜检测肝内胆管上皮细胞自噬小体;蛋白质印迹法检测STAT3/pSTAT3、Beclin-1表达.培养人肝内胆管上皮细胞(HiBECs)干扰其STAT3,在甘氨鹅脱氧胆酸钠(GCDC)作用下加入UC-MSCs,检测微管蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)表达.采用t检验和单因素方差分析进行统计分析.结果 与对照组相比,PBC组肝脏可见胆管周围炎症细胞浸润及肉芽肿形成,经MSCs治疗的小鼠肝脏汇管区炎性细胞浸润减少,未见肉芽肿形成.PBC小鼠血清抗PDC-E2抗体高滴度阳性(107±18) ng/ml,高于对照组(42±6) ng/ml (q=6.326,P＜0.01),而MSCs治疗可显著降低其水平(43±4) ng/ml(q=5.801,P＜0.01).电镜结果提示PBC组肝内胆管上皮细胞自噬小体数量[(5.00± 1.29)个]较对照组[(1.75±0.25)个]有增多趋势(q=4.061,P＞0.05).蛋白质印迹法结果提示PBC组Beclin-1的表达(1.80±0.36)明显高于对照组(0.40±0.20)(q=6.757,P＜0.01),MSCs治疗组(0.86±0.06)可显著降低PBC组Beclin-1的水平(q=4.536,P＜0.05),Stattic也有同样作用(0.72±0.03)(q=5.226,P＜0.05).PBC组STAT3(1.80±0.42)(q=5.730,P＜0.05)及pSTAT3(2.04±0.29)(q=6.492,P＜0.01)表达高于对照组(0.50±0.05)、(0.91±0.14),MSCs治疗后STAT3(0.51 ±0.13)(q=5.703,P＜0.01)及pSTAT3(0.76±0.07)(q=7.388,P＜0.01)表达均下降.体外培养HiBECs在干扰STAT3后,MSCs不能明显改变LC3Ⅱ的表达量.结论 PBC小鼠肝内胆管上皮自噬存在异常,MSCs可通过下调STAT3减少其自噬治疗PBC.
关键词： 间充质干细胞 原发性胆汁性肝硬化 自噬 信号转导子和转录激活子3 -
细胞死亡调节因子GRIM-19在肿瘤及非肿瘤疾病中的作用
干扰素-维甲酸诱导的细胞死亡调节因子19 (GRIM-19)在正常人体的多数组织中均有分布,有调节细胞生长、凋亡和迁移等功能.GRIM-19的低表达或缺失以及位点的突变都会导致细胞的异常增殖和恶变,与肿瘤、细菌和病毒感染、早期胚胎发育、先天性免疫反应等多种疾病的发生发展密切相关.因此,GRIM-19可能成为疾病治疗的一个靶点.本文主要对GRIM-19在肿瘤和非肿瘤疾病中的机制和作用进行综述.
关键词： GRIM-19 细胞凋亡 肿瘤 信号转导子和转录激活子3 -
心肌营养素-1在柯萨奇病毒感染心肌细胞中的作用
目的 探讨在柯萨奇病毒感染心肌细胞中心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)是否通过STAT3途径发挥治疗作用.方法 建立柯萨奇B3病毒(CVB3)感染心肌细胞模型,将SD大鼠原代心肌细胞培养48 h后随机分为5组:Con组、Virus组、CT-1组、AG490组、AG490+ CT-1组.各组于相应处理后培养30 min,通过Western blot测定STAT3活化水平,分别于培养12h、24h、36 h时观察各组心肌细胞病变、搏动情况,测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,观察细胞损伤程度.结果 Virus组、AG490+ CT-1组、AG490组心肌细胞感染CVB3后,逐步出现细胞病变,细胞搏动停止,培养液中LDH水平明显高于Con 组(P＜0.05),心肌酶逐渐升高与前一时间点比较(P＜0.05).CT-1组磷酸化STAT3( P-STAT3)水平与Con组相比明显增高(P＜0.05),心肌细胞病变明显减轻,LDH释放量显著减少,与Virus组比较差异显著(P＜0.05).AG490+ CT-1组较Con组及CT-1组STAT3磷酸化水平显著减低,心肌细胞病变明显,LDH释放量明显增高(P＜0.05),与Virus组比较无显著差异(P＞0.05).结论 CT-1在CVB3感染心肌细胞过程中具有心肌保护作用,STAT3磷酸化抑制剂AG490可阻断这一保护作用,提示在病毒感染时CT-1通过介导STAT3磷酸化发挥心肌细胞保护作用.
关键词： 病毒性心肌炎 心肌营养素-1 信号转导子和转录激活子3 -
RNAi沉默STAT3基因对结肠癌HCT116细胞侵袭的调控
目的:观察RNA干扰沉默STAT3基因对结肠癌细胞侵袭的影响,并探讨其可能机制.方法:应用STAT3 小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染处理人结肠癌细胞系HCT116后,采用RT-PCR检测STAT3 mRNA表达,软琼脂集落培养试验检测锚着不依赖性增殖,Boyden小室模型试验检测癌细胞的侵袭性,琼脂糖凝胶电泳和TUNEL检测癌细胞失巢凋亡.结果:STAT3 siRNA可有效抑制结肠癌细胞集落生长和侵袭能力,且与浓度相关.琼脂糖凝胶电泳和TUNEL结果显示,STAT3 siRNA转染可诱导结肠癌细胞失巢凋亡,且与浓度相关.结论:STAT3 siRNA可抑制结肠癌细胞的恶性侵袭,其机制与诱导失巢凋亡有关.
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受损坐骨神经中STAT3表达和酪氨酸磷酸化的变化及重组CNTF的作用
研究周围神经修复后,受损周围神经中信号转导子和转录激活子3(STAT3)表达和酪氨酸磷酸化的变化及睫状神经营养因子(CNTF)的作用.用硅管套接切断的成年大鼠坐骨神经,术时在受损神经处给予重组CNTF,用免疫组织化学ABC法结合计算机图像分析观测修复侧神经中STAT3、磷酸化酪氨酸(PTyr)的分布和相对含量.在生理盐水组修复侧神经中,轴突、雪旺细胞STAT3的含量升高,轴突、雪旺细胞、单核细胞的PTyr含量升高;CNTF组修复侧神经上述细胞成分的STAT3和PTyr含量更高.提示受损坐骨神经的STAT3表达上调,酪氨酸磷酸化增强,外加重组CNTF有进一步增强的作用.
关键词： 神经损伤 睫状神经营养因子 信号转导子和转录激活子3 磷酸化酪氨酸 CD68 -
STAT3-siRN表达载体的构建及其对胃癌细胞株HGC-27细胞增殖的影响
目的 构建针对信号转导子和转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的小干扰RNA( siRNA)表达载体STAT3-siRNA,研究siRNA干扰STAT3基因表达后对人胃癌细胞株HGC-27细胞增殖作用的影响.方法 设计并合成两个STAT3-siRNA片段,经脂质体介导转染HGC-27细胞,RT-PCR和Westernblot检测转染后HGC -27细胞中STAT3 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测STAT3-siRNA对HGC-27细胞增殖作用的影响.结果 酶切及测序鉴定证实STAT3-siRNA1和STAT3-siRNA 2表达载体均构建成功.RT-PCR和Western blot结果显示,转染后STAT3 mRNA和蛋白的表达量均下降,与空白对照组及si-NC转染对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.01),其中以STAT3-siRNA1干扰效果更明显.MTT结果显示,转染STAT3-siRNA1后,HGC -27细胞的增殖能力明显下降,与si-NC转染对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 本研究构建的STAT3-siRNA表达载体可有效抑制STAT3在胃癌细胞株HGC-27中的表达,并抑制胃癌细胞的生长.
关键词： 信号转导子和转录激活子3 RNA干扰 胃肿瘤 增殖 -
非重型再生障碍性贫血患者血清对32D细胞凋亡及Stat3蛋白磷酸化的影响
目的 探讨非重型再生障碍性贫血(NSAA)患者血清对32D细胞凋亡及细胞内信号转导子和转录激活子( Stat3)蛋白磷酸化的影响.方法 采集12例NSAA患者(NSAA组)和12例正常健康体检者(对照组)血清,分别孵育小鼠32D细胞后进行细胞计数并检测细胞存活率、凋亡率及细胞内Stat3蛋白的磷酸化水平.结果 血清孵育12、24、36、48 h后,NSAA组32D细胞内的Stat3蛋白磷酸化水平均高于对照组,以孵育24h后差异大(P＜0.05).孵育24h后,NSAA组较对照组细胞计数显著减少(P＜0.05),细胞存活率低于对照组但无统计学意义,而细胞凋亡率显著高于对照组(P＜0.05).结论 NSAA患者的血清在体外作用24 h后可诱导32D细胞凋亡并上调Stat3蛋白磷酸化水平,Stat3蛋白的磷酸化增多可能参与NSAA患者血清诱导32D细胞凋亡的信号传导过程.
关键词： 贫血 再生障碍性 细胞凋亡 信号转导子和转录激活子3 -
食管肿瘤癌变过程中Stat3和Ki-67基因表达变化及意义
目的 探讨食管肿瘤癌变的机制.方法 对1998年食管内镜普查诊断为食管异型增生的57例患者随访2 a,40例仍为异型增生(未癌变组),17例进展为早期癌(癌变组).对2次活检组织标本分别采用免疫组化SP法行信号转导子和转录激活子3(Stat3)和Ki-67蛋白检测.结果 1998年标本Stat3和Ki-67在两组表达差异无统计学意义(P＞0.05);2000年标本二者表达均升高,但癌变组高于非癌变组(P＜0.05).癌变组Stat3和Ki-67 2 a中由阴性变为阳性的比率均分别高于非癌变组(P＜0.05).17例食管早期癌标本中Stat3和Ki-67的相关分析示二者存在正相关(P＜0.05).结论 Stat3和Ki-67尤其是Stat3可能在食管癌变中起关键作用,阻断Stat3的表达可能阻断Ki-67表达,从而阻断食管癌变进程;此可能为食管癌的基因治疗提供理想靶点.
关键词： 食管早期癌 异型增生 信号转导子和转录激活子3 -
外源性胆红素对缺血缺氧性脑损伤大鼠认知功能及海马组织中蛋白酪氨酸激酶2/信号转导子与激活子3/B细胞淋巴瘤基因-2通路的影响
目的 观察外源性胆红素对缺血缺氧性脑损伤大鼠认知功能及海马组织中蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导子与激活子3(STAT3)/B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)通路的影响.方法 将72只无特定病原体级7日龄雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、地塞米松组及外源性胆红素低、中、高剂量组,每组12只.各组大鼠腹腔注射水合氯醛麻醉,分离左侧颈总动脉,用丝线结扎颈外动脉(假手术组大鼠只穿线不结扎),模型制备4h后,地塞米松组大鼠腹腔内注射10 mg·kg-1地塞米松,外源性胆红素低、中、高剂量组大鼠分别腹腔内注射5、10、15 mg·kg-1外源性胆红素,假手术组、模型组大鼠腹腔内注射等量的生理盐水,连续2周.采用水迷宫实验检测各组大鼠的认知功能,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法检测各组大鼠海马组织中细胞凋亡情况,采用Western blot法检测各组大鼠海马组织中p-JAK2、p-STAT3及Bcl-2蛋白表达情况.结果 与假手术组比较,模型组大鼠Moms水迷宫实验第1、2、3、4天逃避潜伏时间均显著延长(P＜0.05),穿越平台次数及探索平台速度均显著降低(P＜0.05),海马组织细胞凋亡率及海马组织中p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2表达水平均显著升高(P＜0.05).与模型组比较,地塞米松组和外源性胆红素低、中、高剂量组大鼠Morris水迷宫实验第1、2、3、4天逃避潜伏时间均显著缩短(P＜0.05),穿越平台次数及探索平台速度均显著增加(P＜0.05),海马组织细胞凋亡率及海马组织中p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2表达水平均显著降低(P＜0.05).与地塞米松组比较,外源性胆红素低、中剂量组大鼠Morris水迷宫实验第1、2、3、4天逃避潜伏时间显著延长(P＜0.05),穿越平台次数及探索平台速度均显著降低(P＜0.05),海马组织细胞凋亡率及海马组织中p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2表达水平均显著升高(P＜0.05).外源性胆红素高剂量组与地塞米松组大鼠Moms水迷宫实验第1、2、3、4天逃避潜伏时间、穿越平台次数及探索平台速度、海马组织细胞凋亡率及海马组织中p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2表达水平比较差异均无统计学意义(P＞0.05).随着外源性胆红素剂量增加,外源性胆红素低、中、高剂量组大鼠Morris水迷宫实验第1、2、3、4天大鼠逃避潜伏时间呈缩短趋势,穿越平台次数及探索平台速度呈增加趋势,海马组织细胞凋亡率及海马组织中p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2表达水平呈降低趋势,组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 外源性胆红素能够提高缺血缺氧性脑损伤大鼠的认知功能,抑制海马组织细胞凋亡,这一作用可能是通过调控JAK2/STAT3/Bcl-2通路的活性而实现.
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黄连吴茱萸组分配伍对高脂血症大鼠JAK2/STAT3通路的影响
目的 通过考察黄连吴茱萸组分配伍对高脂血症模型大鼠血清瘦素(Leptin)、肝脏组织中瘦素受体(Ob-Rb)、酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)表达的影响,探讨其对高脂血症大鼠JAK2/STAT3信号转导通路的影响.方法 建立SD大鼠高脂血症模型,将造模成功的大鼠随机分为模型对照组、辛伐他汀组(7mg/kg)、黄连吴茱萸组分配伍中剂量组(44.6mg/kg)、黄连吴茱萸组分配伍高剂量组(89.1 mg/kg),除空白组外,其余各组继续采用高脂饲料喂养,连续灌胃给药8周,检测各组动物血清甘油三脂(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),及血清瘦素(Leptin)含量;HE染色检测各组肝脏病变程度;采用Western blot方法检测各组大鼠肝脏Ob-Rb、JAK2、及STAT3蛋白表达.结果 黄连吴茱萸组分配伍能显著降低高脂血症模型大鼠血清TC、TG、LDL-C含量(P＜0.05或P＜0.01),升高HDL-C含量(P＜0.05),改善模型对照组大鼠肝脏的纤维化病变,降低血清Leptin含量(P＜0.01).与模型对照组比较,黄连吴茱萸组分配伍干预后,高脂血症模型大鼠肝脏中Ob-Rb、JAK2和STAT3表达升高(P＜0.05或P＜0.01).结论 黄连吴茱萸配伍能有效改善高脂模型大鼠血脂水平,其可能通过调节JAK2/STAT3信号转导通路实现.
关键词： 黄连吴茱萸 组分配伍 酪氨酸蛋白激酶2 信号转导子和转录激活子3 高脂血症 -
联合抑制缺氧诱导因子1α和STAT3对人喉鳞状细胞癌裸鼠移植瘤化疗增敏作用的研究
目的:探讨联合抑制缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和信号转导子和转录激活子3(STAT3)对裸鼠人喉鳞状细胞癌移植瘤化疗增敏的作用.方法:将制备的喉癌移植瘤裸鼠随机分为空白对照组(A组)、顺铂化疗组(B组)、顺铂化疗联合AG490组(C组)、顺铂化疗联合HIF-1α-/组(D组)、顺铂化疗联合AG490加HIF-1α-/-组(E组)和HIF-1α-/-组(F组).给予腹腔注射顺铂3 mg/kg连续3d,然后间隔给予顺铂和10 mg/kg AG490连续12 d.应用免疫组织化学法检测Ki67和HIF-1α表达.应用Western blot法检测p-STAT3表达.结果:C组、D组与B组比较HIF-1α表达均有显著差异(t值分别为2.782、3.873,均P＜0.05);E组与C组、D组比较HIF-1α表达均有显著差异(t值分别为6.140、3.667,均P≤0.01).C组与B组比较p-STAT3表达明显降低(t=17.840,P＜0.01);D组与B组比较p-STAT3表达元明显差异(t=0.038,P＞0.05);E组与C组、D组比较p-STAT3表达明显降低(均P＜0.01).E组与B组比较抑瘤率有显著差异(t=5.509,P＜0.01);E组与C组、D组比较抑瘤率均有显著差异(t值分别为3.422、2.718,均P＜0.05).E组与B组、D组比较Ki67指数有显著差异(t值分别为8.307、4.524,均P＜0.01);E组与C组比较Ki67指数有显著差异(t=3.736,P＜0.05).结论:联合抑制HIF-1α表达和STAT3通路对于头颈鳞状细胞癌的增殖抑制作用明显较单独抑制一种通路强.
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柚皮苷抗高糖诱导的心肌细胞损伤作用与抑制STAT3通路有关
目的 探讨柚皮苷是否通过抑制信号转导子和转录激活子3(STAT3)通路保护H9c2心肌细胞对抗高糖引起的损伤.方法 应用35 mmol/L的高浓度葡萄糖(高糖,HG)处理H9c2心肌细胞24h,建立HG损伤心肌细胞模型;细胞计数试剂盒8测定细胞存活率;Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相法测定细胞凋亡;双氯荧光素染色/荧光显微镜照相法测定胞内活性氧(ROS)水平;罗丹明123染色法测定线粒体膜电位(MMP);Western blot法测定STAT3蛋白表达水平.结果 HG处理H9c2心肌细胞24h能引起明显的损伤,使细胞存活率降低,凋亡细胞数量和胞内ROS生成增多,MMP丢失;HG能增加STAT3磷酸化水平;柚皮苷预处理能明显抑制HG上调STAT3磷酸化水平这一作用;柚皮苷和STAT3通路抑制剂AG490能阻断HG对心肌细胞的上述损伤作用,包括细胞毒性、凋亡、ROS生成增多及MMP丢失等.结论 柚皮苷可通过抑制STAT3通路保护H9c2心肌细胞对抗高糖引起的损伤.
关键词： 柚皮苷 高血糖 信号转导子和转录激活子3 心肌细胞 活性氧 -
加味温胆汤对脑缺血再灌注损伤大鼠酪氨酸蛋白激酶2与信号转导子和转录激活子3蛋白表达及细胞凋亡的影响
目的：探讨加味温胆汤对脑缺血再灌注损伤（CIRI）大鼠酪氨酸蛋白激酶2（JAK2）与信号转导子和转录激活子3（STAT3）蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法选用健康雄性SD大鼠120只，随机分为4组，每组30只。正常对照组无任何干预；假手术组仅切开颈部皮肤，暴露左侧颈总动脉；脑缺血再灌注模型组、加味温胆汤治疗组均采用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉脑缺血再灌注模型，然后分别给予蒸馏水灌胃和加味温胆汤灌胃。分别于缺血再灌注后3、12、24、48、72 h对各组大鼠进行神经功能ZeaLonga评分并检测脑组织 JAK2、STAT3蛋白表达及神经细胞凋亡情况。结果（1）正常对照组及假手术组大鼠无神经功能缺损表现；脑缺血再灌注模型组、加味温胆汤治疗组大鼠均出现神经功能缺损，ZeaLonga评分均高于正常对照组及假手术组（P＜0．05）。（2）与正常对照组、假手术组大鼠相比，各时间点脑缺血再灌注模型组、温胆汤加味治疗组大鼠磷酸化JAK2、磷酸化STAT3灰度值明显降低（P＜0．05），缺血再灌注后24 h温胆汤加味治疗组磷酸化JAK2、磷酸化STAT3灰度值表达高于脑缺血再灌注模型组（P＜0．05）。（3）与正常对照组及假手术组大鼠比较，各时间点脑缺血再灌注模型组、加味温胆汤治疗组大鼠脑细胞凋亡率明显升高（P＜0．05），而缺血再灌注后24 h加味温胆汤治疗组大鼠脑细胞凋亡率低于脑缺血再灌注模型组（P＜0．05）。结论脑缺血再灌注引发JAK2、STAT3通路激活加重神经细胞损伤和凋亡，加味温胆汤可通过抑制JAK 2S／TAT3通路活化减少神经细胞凋亡，从而减轻CIRI。
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AG490抑制转化生长因子β1-STAT3信号通路逆转肝纤维化的机制研究
目的 探讨转化生长因子(TGF)-β 1、信号转导子和转录激活子3(STAT3)信号通路在二乙基亚硝胺(DENA)诱导肝纤维化大鼠模型中的动态变化及STAT3抑制剂AG490对其的影响.方法 建立DENA大鼠肝纤维化模型和AG490干预模型,分别于第0、4、8周收集肝组织,观察肝脏病理纤维化和炎症程度,STAT3T、 TGF-β 1蛋白质和基因表达变化,肝纤维化因子α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-cadherin (E-Cad)、MMP2和TIMP1表达.两组数据间比较采用独立样本t检验,3组以上数据组间比较采用单因素方差分析. 结果 DENA大鼠的肝组织炎症及纤维化程度随着时间而逐渐加重,STAT3和TGF-β 1 mRNA在重度肝纤维化(AF)组表达显著高于轻度肝纤维化(EF)组(P值分别为0.034,0.012),且两者呈现一致的增高表达趋势.TGF-β 1、p-Smad2、α[-SMA、E-Cad、STAT3和p-STAT3蛋白质表达水平在AF组显著高于对照组(P值分别为0.048、0.003、0.002、0.028、0.009和0.039);而E-Cad蛋白水平在AF组显著低于EF组(P=0.026).免疫荧光检测结果显示在重度肝纤维化肝组织的汇管区中可见STAT3和TGFβ 1共表达现象.AG490治疗后的DENA大鼠,免疫组织化学检查可见肝组织内的STAT3和TGFβ 1蛋白均被显著抑制.在AF大鼠中,STAT3、TGF-β 1、MMP2和TIMP1蛋白质表达在AG490治疗后均显著被抑制(P值分别为0.006、0.018、0.010和0.005).AG490治疗后AF大鼠与未治疗AF组比,炎症和肝纤维化程度均明显减轻(P值分别为0.042和0.021).结论 STAT3信号转导可能调控TGF-β 1而影响肝纤维化形成,尤其在进展期肝纤维化阶段.AG490可抑制TGF β1-STAT3信号通路而产生逆转肝纤维化作用.
关键词： 肝硬化 转化生长因子β1 信号转导子和转录激活子3 -
苇茎汤调控人肺腺癌A549细胞中EGFR、STAT3抗凋亡的机制研究
目的:研究苇茎汤对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响.方法:将苇茎汤培养液浓度稀释为0.25、2.5、25g/L,与A549细胞共同培养,AO/EB荧光染色观察细胞凋亡形态学改变;流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡率;Real-time PCR检测EGFR、STAT3基因的表达.结果:0.25 ～ 25g/L苇茎汤能诱导A549细胞发生凋亡形态学改变,且细胞凋亡率随苇茎汤浓度增加而升高;苇茎汤可将A549细胞周期阻滞于G0/G1期;Real-timePCR结果表明,苇茎汤可以下调A549细胞中EGFR、STAT3基因的表达.结论:苇茎汤可能通过调控EGFR、STAT3信号通路诱导人肺腺癌A549细胞发生早期凋亡.
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大鼠面神经切断及修复后面神经核内STAT3的变化
目的探讨面神经损伤及修复条件下, 面神经核运动神经元STAT3 mRNA和蛋白的变化规律. 方法采用原位杂交和免疫组化染色法, 观察成年大鼠面神经切断和即刻端端吻合后面神经核STAT3 mRNA和蛋白的时程变化. 结果面神经切断后损伤侧面神经核STAT3 mRNA信号的强度增加, 在术后第21 d和35 d, 面神经单纯切断组和面神经切断后端端吻合组间STAT3 mRNA信号的强度相差显著(P<0.05). 结论面神经损伤后, 面神经核运动神经元内由STAT3介导的细胞因子的信号转导增加.在面神经无再生状态下, STAT3表达上调呈持续性; 而在面神经再生状态下, 随着面神经的成功再生, STAT3可逐渐恢复至正常水平.
关键词： 面神经 运动神经元 神经切断 神经吻合 信号转导子和转录激活子3
