首页 > 文献资料
-
基质金属蛋白酶-2沉默对喉癌侵袭生长的影响
目的 探讨重组慢病毒介导的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)沉默对喉鳞癌侵袭生长的抑制作用.方法 该研究于2016年1—3月,采用RNA干扰技术,运用MMP-2基因siRNA的重组慢病毒(MMP-2-RNAi-Lentivirus)转导喉鳞癌Hep-2细胞,通过侵袭小室实验观察MMP-2-RNAi-Lentivirus转染后喉癌细胞侵袭能力的变化;构建喉鳞癌动物模型时,18只BALB/c Nude裸鼠肿瘤生长直径达到1.0 cm时随机分组,治疗组9只,空载体对照组9只,给予瘤内注射等量的GFP-Lentivirus,进一步观察其对喉癌侵袭转移的影响.结果 侵袭实验显示,实验组Hep-2细胞穿过人工基底膜的细胞数为(12±4)个,明显少于空载体对照组的(35±6)个,差异具有统计学意义(P<0.05);体内实验显示,MMP-2-RNAi-Lentivirus瘤内注射后,裸鼠移植瘤平均重量为(1.186±0.225)g,平均体积为(0.974±0.216)cm3,对照组分别为(2.127±0.344)g、(1.618±0.272)cm3,实验组低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 重组慢病毒介导的MMP-2基因沉默能有效的抑制喉癌细胞的增殖过程,可为喉癌基因治疗提供实验参考.
-
喉全切除30例术后护理
目的:探讨喉全切除患者手术后的病情观察及临床护理措施.方法:对30例喉全切除患者术后病情的护理、个性化护理预案以及进行语音训练效果等情况,进行了回顾性分析.结果:30例患者手术后均恢复良好,其中有22例能运用口型与动作配合的非语言交流表达需求,8例能利用电子喉发音.结论:必要的心理护理、周密的术前准备、术后密切的病情观察和有效的语音训练,是患者康复的关键.
-
等离子射频消融术治疗声门型喉癌疗效分析
目的：分析研究等离子射频消融术治疗声门型喉癌的疗效。方法：回顾性的选择来自2007年10月至2014年6月收治于本院的159例声门型喉癌患者临床资料，对其进行分析。结果：等离子射频手术在彻底切除肿瘤的基础上，可以大限度的保留喉功能，且术中损伤小，术后并发症少，患者易于接受。结论：等离子射频术治疗声门型喉癌是一种更微创更安全的手术方法，值得推广应用。
-
中国2003-2007年喉癌发病率和死亡率分析
目的 研究中国喉癌发病与死亡的流行状况.方法 2003-2007年喉癌发病与死亡数据来源于全国32个肿瘤登记地区,并经全国肿瘤登记中心审核、整理和统计分析,计算粗率、中国和世界标化率及变化趋势.结果 2003-2007年中国喉癌粗发病率为2.04/10万,粗死亡率为1.06/10万,均为男性高于女性,城市高于农村；在32个登记地区中发病中标率高是广东省中山市(2.08/10万),死亡中标率高是河北省涉县(1.58/10万)；2003-2007年全国喉癌发病率和死亡率变动不大.结论 中国喉癌发病率、死亡率处于较低水平,但应采取综合措施,防止喉癌发病率和死亡率上升.
-
针药结合麻醉下新声门再造
本文介绍30例针药结合麻醉下行新声门再造术.体针取扶突、合谷穴,术前选用哌替啶、颅痛定、甲氧氯普胺等镇痛药物,行针药复合麻醉,成功率达96.7%.
-
声门上型喉癌术后改良修复法在老年患者中的应用
目的：探讨老年患者声门上型喉癌术后修复方法的改良及其喉功能保留效果。方法回顾性分析2007年1月—2012年12月,安徽医科大学第一、第四附属医院耳鼻咽喉头颈外科收治的35例声门上型喉癌老年患者的临床资料。其中男34例、女1例,年龄65~75岁,均行喉功能保留手术治疗。原发病灶位于一侧声门上者行保留对侧喉上神经声门上部分喉切除,原发病灶位于声门上中间者行不同部分的声门上部分喉切除；然后,采用颈前带状肌延长舌根方法修复或小喉成型方法进行咽喉功能重建。术后观察患者喉功能恢复情况及3年、5年生存率。结果35例患者术后10 d~3个月逐步恢复发音,其中32例发音良好,另外3例发音嘶哑；术后第10天试饮水,其中30例无明显呛咳后进食半流质,5例呛咳明显者经功能锻炼3个月后进食呛咳基本消失。33例于术后15天到3个月拔管,拔管率94.29％(33/35)。无一例并发严重肺部感染。35例中,随访满3年者32例,失访3例。32例中,5例在术后12~18个月复发,行全喉切除术；4例在术后20~32个月死于喉癌复发,2例术后18、23个月死于其他疾病；3年生存率为81.25％(26/32)。随访满5年者19例,失访5例,术后未满5年11例。随访5年的19例中,6例分别于术后20~54个月死于喉癌复发,3例术后18~56个月死于其他疾病,5年生存率为10/19。结论老年人声门上型喉癌术后可通过改良修复方法加快发音和吞咽功能的恢复,从而大限度地减少误吸。
-
喉颗粒细胞瘤
目的讨论喉颗粒细胞瘤的组织发生、形态学特点和生物学行为.方法报道3例喉颗粒细胞瘤并进行组织形态学、组织化学及免疫组织化学染色研究,结合文献对本病的诊断标准、鉴别要点及组织来源进行探讨.结果喉颗粒细胞瘤组织学形态特点与其他软组织颗粒细胞瘤基本一致,但50%～60%伴有肿瘤表面鳞状上皮呈假上皮瘤样增生.免疫组化S-100、Vimentin、CD68、MBP等在肿瘤细胞胞浆内呈阳性表达,PAS染色中胞浆为阳性反应.结论发生于喉部的颗粒细胞瘤为罕见肿瘤,通常为良性肿瘤,采用局部切除法治疗,预后好.多数学者认为该肿瘤起源于雪旺细胞.
-
喉低级别肌纤维母细胞肉瘤临床病理观察
目的 探讨喉低级别肌纤维母细胞肉瘤(LGMS)的临床病理特征、诊断及鉴别诊断.方法 对1例喉LGMS进行形态学及免疫组化观察,并复习相关文献.结果 患者男性,59岁.临床表现为声嘶、呼吸困难及吞咽疼痛.肿瘤位于喉室左侧黏膜下,组织学显示呈束状、旋涡状或不规则形排列;瘤细胞呈胖梭形,胞质界限不清、淡嗜酸性,核两端逐渐变尖,多形性明显;部分区域血管丰富并见灶性坏死.免疫组化示SMA、calponin和desmin (+),而CK、S-100和h-caldesmon(-).结论 发生于喉的LGMS极为罕见,其形态学诊断易与其他梭形细胞肿瘤(如肉瘤样癌及恶性纤维组织细胞瘤等)相混淆.本瘤易复发但很少转移,治疗以手术为主,应注意密切随访.
关键词： 喉肿瘤 低级别肌纤维母细胞肉瘤 临床病理 免疫组化 -
早期喉癌手术切缘组织p53和c-myc表达与局部复发的关系
目的 检测p53和c-myc蛋白在早期喉癌手术切缘组织中的表达及其与肿瘤局部复发的关系.方法 选择2004-2010年间唐山市协和医院185例喉癌激光手术常规病理学检查手术切缘为阴性但术后肿瘤局部复发的24例为复发组,随诊2年无局部复发的161例为无复发组.免疫组化法检测2组手术切缘p53和c-myc蛋白.结果 复发组手术切缘中p53蛋白阳性率为66.7％(16/24)明显高于无复发组18.6％ (30/161) (P ＜0.05);复发组c-myc蛋白阳性率为83.3％(20/24),无复发组80.1％(129/161).2组之间差异不显著(P＞0.05).结论 喉癌手术切缘中p53蛋白阳性与术后局部复发明显相关,可预测喉癌术后局部复发高危患者及指导术后辅助治疗.
-
喉神经内分泌癌3例报道及文献复习
目的报道3例喉原发性神经内分泌癌,并探讨其病理学特征及其鉴别诊断.方法对3例喉神经内分泌癌进行光镜、电镜观察及免疫组化标记.结果3例肿瘤均位于声门上会咽区,大体直经＜3 cm,2例呈息肉状.光镜检查2例肿瘤以巢团状结构为主,瘤细胞胞质丰富,嗜酸性,核分裂象易见,有坏死.1例以小梁状结构为特征,瘤细胞较小,分裂象罕见,无坏死.免疫组化标记显示瘤细胞CgA、Syn、CK(AE1)及NSE(+),S-100、HMB45及GFAP(-).电镜观察瘤细胞间有细胞连接复合体、细胞内腔及神经内分泌颗粒.结论喉神经内分泌癌是少见的恶性肿瘤,形态学上应当与喉的低分化鳞癌、副节瘤、无色素性黑色素瘤等相鉴别.免疫组化标记及电镜观察对于鉴别诊断很有帮助.
-
喉腺样囊性癌1例
患者男性,32岁,持续性声音嘶哑6个月.入院后行直接喉镜下声门肿物活检,术中见右侧声带下有一隆起,约1.8cm×1.5cm×1.5cm,基底较广,表面黏膜色泽正常无充血,双带活动尚可常规实验室检查均正常,考虑为"喉肿瘤",行喉肿瘤扩大切除术.术中送组织冷冻切片,诊断:小细胞癌,考虑为腺样囊性癌,侵犯横纹肌组织
-
喉假血管性鳞状细胞癌一例
患者男,73岁.因声嘶、咽部不适,于2010年3月至浙江大学医学院附属二院就诊.患者4个月前出现持续性声音嘶哑,有咽部不适、痰阻感,不伴咽痛、发热,休息后症状改善不明显.喉内镜示左声带巨大新生物,以"喉肿瘤"收住入院.
-
星形胶质细胞上调基因1在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义
目的 检测星形胶质细胞上调基因1(AEG-1)在喉鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达,并探讨其表达与喉鳞癌临床病理特征和预后之间的关系.方法 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定AEG-1 mRNA在13对配对喉鳞癌及癌旁黏膜组织中的表达.同时,免疫组织化学技术检测AEG-1蛋白在88例喉鳞癌及15例癌旁黏膜组织中的表达,并统计分析其表达水平与临床病理特征及预后的关系.结果 AEG-I蛋白在15例癌旁黏膜组织中仅呈阴性或弱阳性表达；AEG-1 mRNA在喉鳞癌组织中的相对表达量较癌旁黏膜显著升高(0.81 ±0.17比0.23 ±0.10;t=10.337,P＜0.01)；88例喉鳞癌组织中,AEG-1蛋白的阳性表达率为87.5％(77/88).且AEG-1蛋白表达水平与喉鳞癌患者T分期(x2 =6.289,P =0.018)、临床分期(x2=11.049,P＜0.01)、转移(x2=20.859,P＜0.01)及术后复发(x2=13.459,P＜0.01)密切相关.生存分析显示AEG-1蛋白高表达组与低表达组患者5年总生存率分别为35.9％与86.4％,差异具有统计学意义(x2=23.409,P＜0.01)；多因素分析示AEG-1蛋白表达水平为喉鳞癌患者预后的独立影响因素(P=0.016).结论 AEG-1蛋白可能在喉鳞癌的发生、发展中发挥了重要作用,对喉鳞癌患者的预后具有评估价值.
-
组蛋白去乙酰化酶2表达下调对喉鳞癌Hep-2细胞凋亡和增殖及迁移的影响
目的 探讨组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)表达下调对喉鳞癌Hep-2细胞增殖、细胞凋亡和细胞迁移的影响.方法 利用脂质体2000将HDAC2小干扰RNA (siRNA)和对照siRNA转染喉鳞癌Hep-2细胞,将细胞分为3组:未处理组、siRNA对照组和HDAC2 siRNA转染组.利用Westernblot检测转染HDAC2 siRNA后喉鳞癌Hep-2细胞中HDAC2蛋白的表达;利用CCK-8分析3组细胞增殖的变化;采用流式细胞术检测3组细胞凋亡情况;接着利用Boyden小室研究3组细胞迁移能力的变化,后采用Westem blot研究与细胞凋亡和细胞迁移密切相关蛋白的表达.结果 HDAC2siRNA明显下调喉鳞癌Hep-2细胞中HDAC2蛋白的表达.HDAC2表达下调明显抑制喉鳞癌Hep-2细胞的增殖和诱导细胞凋亡,并抑制喉鳞癌Hep-2细胞的迁移.此外,HDAC2表达下调明显增加caspase-3和caspase-9的表达,但降低基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达.结论 HDAC2可能在喉鳞癌发生发展中发挥重要作用,其表达下调介导的细胞凋亡和迁移抑制可能与caspase-3和caspase-9表达的升高以及MMP-2和MMP-9表达的降低相关.
-
microRNA－10a－5p在喉癌前病变组织中的表达
目的：探讨microRNA－10a－5p（miR－10a）在喉癌前病变（LEPL）组织中表达的差异，并结合临床因素进行病理分析。方法参考WHO头颈部肿瘤病理学和遗传学（2005）分类系统，运用实时定量聚合酶链式反应方法检测miR－10a在94例LEPL组织中[轻度异型增生（ MID）、中度异型增生（ MOD）、重度异型增生（ SD）及原位癌（ CIS）]的表达，并比较各组间的表达差异，结合临床资料及随访结果分析miR－10a与各组别LEPL患者临床因素的相关性。结果随着LEPL异型程度的增加， miR－10a在LEPL组织中呈下调表达趋势，且在低风险病变组（ MID＋MOD）与高风险病变组（ SD＋CIS）之间的表达差异具有统计学意义（P＝0．03）；线性回归分析显示miR－10a与LEPL患者的性别、组织异型增生的程度存在线性相关（ P＜0．05）。结论 miR－10a在不同级别LEPL组织中的表达呈下调趋势，可为LEPL病理分级和早期喉癌诊断提供辅助参考。
-
应用基因芯片检测喉鳞状细胞癌甲醛固定石蜡包埋组织microRNA表达谱
目的 建立以甲醛固定石蜡包埋组织为材料、基于基因芯片技术的microRNA(miRNA)表达谱的分析方法 ;筛选与喉鳞状细胞癌(简称喉癌)生物学特征密切相关的差异表达miRNA.方法 从喉癌甲醛固定石蜡包埋组织中制备总RNA,经质量鉴定后进行荧光标记.采用Agilent公司的容纳723条人类miRNA探针的基因芯片完成杂交实验,以获得喉癌的miRNA表达谱.以GeneSpring GX和R-Project软件处理分析基因芯片实验数据,筛选与喉癌转移相关的差异表达miRNA.结果 从24例甲醛固定石蜡包埋组织标本中获得了符合基因芯片实验质量标准的RNA样品,并完成了基因芯片杂交及数据分析.从中共鉴定到319个miRNA,有96个miRNA在24例喉癌中均有表达,其中与淋巴结转移密切相关的(检错率<0.05)差异表达miRNA有5个,分别为miR-23a* 、miR-28-5p、miR-15a、miR-16和miR-425.结论 甲醛固定石蜡包埋组织可以提供符合基因芯片分析质量要求的miRNA,是研究miRNA的重要样品资源.从喉癌的miRNA表达谱中筛选出的转移相关差异表达miRNA(miR-23a*、miR-28-5p、miR-15a、miR-16和miR-425)有可能成为评估喉癌转移风险的新型分子标志.
-
SLP-2基因在喉鳞状细胞癌和乳腺浸润性癌组织中的表达及其与预后的关系
目的 探讨两种恶性上皮性肿瘤组织--喉鳞状细胞癌(简称喉癌)和乳腺浸润性癌(简称乳腺癌)中stomatin like protein-2(SLP-2)基因在mRNA和蛋白水平的表达,及其与肿瘤的临床病理参数和预后的相关性.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测了46对喉癌及喉正常上皮组织中SLP-2基因的表达,Western blot方法检测了其中10对标本的SLP-2蛋白表达,同时采用免疫组织化学方法分别检测了104例喉癌组织芯片和263例乳腺癌组织芯片中SLP-2蛋白的表达水平,分析SLP-2蛋白的表达与临床病理变量之间的关系.结果 RT-PCR结果显示SLP-2基因在46例喉癌中的38例肿瘤组织中的表达升高(83%,38/46),喉正常上皮组织中表达阴性.Western blot结果显示,有7例喉癌组织中SLP-2蛋白表达显著高于对应的喉正常上皮组织.喉癌组织芯片的免疫组织化学染色结果显示,与全部20例喉正常上皮组织的阴性表达(0/20)相比,SLP-2蛋白染色在104例喉癌组织中有36例出现了过表达(34.6%,36/104;P=0.000).与喉正常上皮表达相比,喉癌组织中SLP-2基因在mRNA和蛋白水平的表达均明显升高.SLP-2蛋白过表达与喉癌患者的临床分期较晚(P<0.01)和淋巴结发生转移(P=0.003)密切相关.乳腺癌组织芯片免疫组织化学染色结果显示,与在正常乳腺组织中的阴性表达(0/10)相比,SLP-2蛋白在乳腺癌组织中呈现过表达(52.5%,138/263),差异有统计学意义(P:0.000),且该蛋白的过表达与乳腺肿物的大小(P=0.020)、淋巴结转移(P<0.01)、临床分期Ⅲ期(P<0.01)以及发生远处转移(P=0.002)密切相关.此外,还与HER2/neu蛋白的表达存在显著相关性(P:0.037),生存分析表明,SLP-2蛋白过表达乳腺癌患者总生存率显著降低.多因素分析显示淋巴结状态、HER2/neu蛋白表达和SLP-2蛋白表达可能作为独立的预后因子.结论 SLP-2蛋白的过表达可能与喉癌和乳腺癌的侵袭、转移过程密切相关,并可能作为独立的预后指标提示乳腺癌患者预后不良.
关键词： 乳腺肿瘤 喉肿瘤 肿瘤转移 预后 Stomatin like protein-2 -
多基因共沉默治疗人喉鳞癌裸鼠移植瘤
目的 探讨针对血管内皮生长因子(VEGF)、端粒酶逆转录酶(TERT)、Bcl-xl的3个短发夹状双链RNA(shRNA)的串联表达质粒对人喉鳞癌裸鼠移植瘤生长抑制作用及其机制.方法 构建串联表达3个shRNA的质粒pEGFP-shVEGF-shTERT-shBcl-xl.建立人喉鳞癌Hep-2细胞系荷瘤裸鼠模型.将该质粒转染入荷瘤裸鼠瘤体内,观察肿瘤生长情况.荧光定量即时PCR检测三种目的 基因的mRNA在肿瘤组织中的表达情况,Western blot法检测三种蛋白的表达,原位末端标记法(TUNEL法)检测肿瘤细胞凋亡,免疫组织化学sP法检测肿瘤组织微血管密度.结果 与治疗前比较,质粒pEGFP-shVEGF-shTERT-shBcl-xl注射裸鼠皮下移植瘤后,肿瘤生长明显受抑制,治疗后14 d抑瘤率达91.2%.三个目的 基因的mRNA及蛋白表达水平比治疗前均有显著下降.移植瘤组织内检测到大量凋亡细胞,凋亡指数为(60.34±5.32)%.治疗组微血管密度明显低于生理盐水对照组及阴性质粒处理组.结论 pEGFP-shVEGF-shTERT-shBcl-xl能高效特异性地同时抑制3个靶基因在人喉鳞癌Hep-2细胞中的表达,增强基因沉默的多样性,并显著的抑制移植瘤的生长,提示未来应用多基因共沉默治疗喉鳞癌可能具有广阔的前景.
-
RNA干扰人端粒酶逆转录酶基因抑制Hep-2细胞生长增殖的实验研究
目的探讨RNA干扰人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因对Hep-2细胞生长增殖的抑制作用及诱导凋亡作用.方法根据hTERT cDNA序列构建表达hTERT mRNA特异的、含荧光素基因的shRNA真核表达质粒pshRNA1、pshRNA2.随机选取一段与人类基因无同源性的碱基序列构建表达shRNA的含荧光素基因的质粒pshRNA3.构建不表达shRNA的含荧光素基因的对照质粒pshRNA4.实验分为5组:A(pshRNA1)、B(pshRNA2)、C(pshRNA3)、D(pshRNA4)、E(空白培养液).酶切后电泳分析鉴定质粒pshRNA1～3.采用共聚焦显微镜检测质粒转染后细胞荧光表达情况;以蛋白印迹法研究hTERT表达变化;以TRAP-PCR ELISA 法研究端粒酶活性变化;以四甲基偶氮唑盐(MTT)法、倒置相差显微镜及原位细胞凋亡法观察各质粒抑制细胞增殖及诱导凋亡作用.结果(1)质粒pshRNA1～3 SalⅠ酶切后电泳见400 bp小带,与预期插入的目的基因大小一致.共聚焦显微镜下见大量的细胞表达绿色荧光.(2)pshRNA1、2转染细胞后hTERT表达显著降低;细胞端粒酶活性明显受到抑制,A组细胞活性为:0.159±0.039、B组细胞活性为0.163±0.028、E组细胞活性为1.512±0.076.A、B组与E组比较,差异均有统计学意义(P<0.01).(3)与E组细胞吸光度(A)值比较,A、B组细胞各时间点均减小,P值均小于0.01.同等培养条件下,A、B组脱落瓶壁的死亡细胞显著增多,凋亡率明显升高.结论 (1)靶向hTERT mRNA的shRNA真核表达质粒能有效转染 Hep-2细胞;(2)RNA干扰hTERT能显著地抑制Hep-2细胞的生长增殖并诱导细胞凋亡.
-
电吸旋切在支撑喉镜喉乳头状瘤手术中的应用
电吸旋切在支撑喉镜手术中的应用,是耳鼻咽喉科进行声带息肉、小结、肥厚等声带手术的新方法.具有病灶清楚彻底、对组织损伤小、出血少、复发率低等优点,对病人来说是一种安全、有效的手术方法,也是目前提倡的易被病人接受的微创手术之一.2006年12月-2007年12月,我院开展支撑喉镜下电吸旋切乳头状瘤手术49例,均取得了较好的效果,现将手术配合的体会介绍如下.
