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  • 银屑灵片对寻常型进展期银屑病肥胖患者血清瘦素及Wnt5a的影响

    作者:邓家侵;何梓阳;刘全知;伍慧媚

    目的:评价银屑灵片对寻常型进展期银屑病肥胖患者血清瘦素及Wnt家族成员5a(Wingless-type MMTV Integration Site Family,Wnt5a)的影响.方法:选取2017年3月至2017年6月在广东省中医院皮肤科门诊就诊的银屑病患者60例,按随机原则分为对照组和观察组,每组30例.对照组患者给予复方丙酸氯倍他索软膏外涂;观察组患者则给予银屑灵片口服及复方丙酸氯倍他索软膏外涂,连续用药4周.比较临床治疗的有效率,评估治疗前后皮损程度及身体质量指数(BMI),监测用药前后血清瘦素、Wnt5a水平.结果:观察组患者的有效率96.7%较对照组73.3%的有效率明显升高(P<0.05);治疗后观察组患者的PASI评分、BMI、Wnt5a水平显著低于对照组(P<0.05),而2组间瘦素水平变化差异无统计学意义(P>0.05).结论:银屑灵片对寻常型进展期银屑病肥胖患者疗效确切,利于改善银屑病患者的皮损面积、缓解银屑病斑块严重程度,降低BMI,其机制可能与调控瘦素、Wnt5a水平以调节Th1/Th2细胞平衡,减轻机体慢性炎性反应状态有一定相关性.

  • 补肾舒脊颗粒含药血清对人骨髓间充质干细胞Wnt5a、β-catenin mRNA及蛋白表达的影响

    作者:鄢泽然;史光耀;王晓曈;张岚;阎小萍

    目的 探讨补肾舒脊颗粒延缓异位骨化的可能作用机制.方法 体外培养人骨髓间充质干细胞(BMSCs)分为空白组、模型组、对照组及中药高、中、低剂量组.空白组加入基础培养基(3.8ml)+5%正常大鼠血清(0.2ml);模型组加入诱导培养基(4.8ml)+5%正常大鼠血清(0.2ml);西药组加入诱导培养基(3.8 ml)+5%洛索洛芬钠含药血清(0.2 ml);中药高、中、低剂量组分别加入诱导培养基(3.8 ml)+5%补肾舒脊颗粒含药血清(0.2ml).28天后通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot)检测Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA及蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组Wnt5a、β-catenin蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,对照组和中药各剂量组Wnt5a、β-catenin蛋白及mRNA表达均降低(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,中药高剂量组Wnt5amRNA、β-catenin mRNA表达降低,中药中剂量组Wnt5a、β-catenin蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01);与中药低、中剂量组比较,中药高剂量组Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01).与中药低剂量组比较,中药中剂量组Wnt5a蛋白表达降低,中药高剂量组β-catenin蛋白表达升高(P<0.05). 结论 补肾舒脊颗粒可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA及蛋白的表达,从而起到延缓强直性脊柱炎异位骨化的作用.

  • Wnt3a与Wnt5a信号途径转换对造血干细胞衰老的影响

    作者:李双;孙倩倩;余丽梅;赵春华

    造血干细胞(HSCs)衰老是机体造血免疫功能衰老的重要原因,在衰老相关疾病的发生中起着关键作用.一定条件下,经典Wnt3a/β-catenin的激活明显有利于保持HSCs的极性与年轻态、自我更新与增殖、分化能力;非经典Wnt5a信号通路的激活则可通过进一步激活细胞内Cdc42蛋白活化等,促发HSCs 衰老,并间接抑制Wnt3a/β-catenin通路.对Wnt3a向Wnt5a信号通路转换及其干预的研究不但阐释了HSCs衰老发生的机制,更明确了如何延缓衰老,提供了解决衰老相关疾病及保持年轻态的新策略.

  • Wnt5a在雌性小鼠胚胎生殖管道的时空表达

    作者:梁琳琳;朱桂金

    目的 探讨Wnt5a在早期雌性生殖管道发育过程中的表达.方法 正常孕15.5d、17.5d、19.5d和21.5d的小鼠胚胎,PCR鉴定性别,取雌性胎鼠石蜡包埋,连续横断切片,每4张行1张HE染色,1张白片待用.HE染色后获取连续切片图像,根据雌性胚鼠生殖管道解剖走形,识别中肾旁管/子宫解剖定位.选取含有中段中肾旁管/子宫的白片,用SABC免疫组织化学方法 ,检测Wnt5a在不同发育时期雌性生殖管道的表达. 结果 获取含雌性生殖管道的鼠胚切片.同时检测到Wnt5a在孕15.5d到21.5d的雌性鼠胚中段中肾旁管/子宫上皮细胞、间质细胞均有表达,随着鼠胚发育,Wnt5a在间质细胞表达不断增强,差异在统计学上有极显著意义(P<0.01). 结论 Wnt5a在雌性小鼠生殖管道形成过程中发挥作用,可能是诱导子宫发育及分化的关键因子.

  • Wnt5a基因在血液病及白血病细胞株中的表达

    作者:李招权;司维柯;潘静;袁媛;邹全明

    本研究观察Wnt5a在部分血液病及白血病细胞株中的表达情况,为进一步研究Wnt5a在血液肿瘤中的作用及其机制打下基础.用人淋巴细胞分离液分离外周血和骨髓单个核细胞,以RT-PCR检测31例病例标本及3种白血病细胞株中Wnt5a的表达.结果表明:5例AML中4例均为阴性或弱阳性,仅1例完全缓解的病例表达呈强阳性.K562、HL-60细胞的Wnt5a表达也为阴性,Jurkat细胞的Wnt5a表达阳性.6例CML的Wnt5a表达均为阴性.4例ALL中3例为表达阳性或弱阳性,1例表达为阴性;2例CLL为阴性表达;2例MM中Wnt5a表达1例为弱阳性,1例为阴性;3例淋巴瘤中有1例为弱阳性,2例为阴性;2例AA、2例IDA、3例ITP、1例ET及PV Wnt5a表达均为阳性或弱阳性.结论:在31例血液病标本及髓系白血病细胞株中,除ALL外,有明显的Wnt5a表达缺失或降低,而非恶性血液病例中Wnt5a表达普遍呈阳性,提示Wnt5a的表达下调可能与髓系白血病的发生有关.

  • 外源性Wnt5a诱导K562细胞分化表型的实验研究

    作者:袁媛;司维柯;李招权;潘静;赵宸

    本研究探讨外源性Wnt5a诱导K562细胞定向分化的作用.用重组腺病毒AdWntSa、AdGFP感染CHO细胞,分别制备Wnt5a和GFP对照条件培养液,并处理K562细胞1-7天,用光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态变化;采用过氧化物酶(POX)、糖原(PAS)和非特异性酯酶(α-NAE)染色、细胞表面分化抗原CD13、CD14、CD68鉴定K562细胞的分化表型;用流式细胞术检测细胞分化周期的变化.结果表明:与对照GFP条件培养液相比,Wnt5a条件培养液处理的K562细胞形态和超微结构均出现了分化成熟的特征;POX、PAS、α-NAE细胞化学染色均为阳性,并且α-NAE阳性70%可被氟化钠抑制;单核细胞系表面标志抗原CD14、CD68和粒细胞系表面标志抗原CD13经免疫细胞化学染色均呈阳性,但CD13与对照比较无显著性差异;Wnt5a处理K562细胞5天,细胞周期阻滞在G2期.结论:外源性的Wnt5a可诱导K562细胞向成熟方向分化,并且有向单核细胞系分化的现象.

  • Wnt5a对人肝星状细胞促炎细胞因子IL-1β及IL-6表达的影响

    作者:董爽;吴晨明;胡君伟;王芹芹;简易成;何益;钟杰;熊伍军

    目的 研究Wnt5a对肝星状细胞(HSC)促炎细胞因子IL-1β及IL-6表达的影响,探讨Wnt5a在肝纤维化中的作用及机制.方法 采用脂多糖(LPS)和肿瘤坏死因子(TNF-α)刺激人肝星状细胞株LX-2,以qRT-PCR和Western blot检测Wnt5a表达水平变化;分别利用Wnt5a重组蛋白体外刺激LX-2和Wnt5ashRNA病毒转染LX-2,以qRT-PCR、ELISA检测促炎细胞因子IL-1β、IL-6的水平变化.结果 LPS及TNF-α可显著刺激LX-2 Wnt5a表达增加(P<0.05);Wnt5a重组蛋白可促进LX-2细胞IL-1β、IL-6表达和分泌(P<0.05);Wnt5a shRNA转染LX-2后IL-1β、IL-6表达水平显著降低(P<0.05),ELISA发现Wnr5a shRNA转染组培养上清IL-1β、IL-6水平显著低于pLVX-NC-shRNA组与LX-2组(P<0.05).结论 Wnt5a可促进HSC促炎细胞因子IL-1β、IL-6的表达而参与肝纤维化进程.

  • 大鼠及人先天性肛门直肠畸形中Wnt5a及BMP7基因的表达研究

    作者:李超;陈霞

    目的 探讨Wnt5a及骨形成蛋白7(BMP7)基因在先天性肛门直肠畸形中的表达.方法 将已受孕的大鼠(35只)根据是否胃管注入乙烯硫脲(ETU)以及是否存在肛门直肠畸形分为对照组(12只)、ETU无畸形组(8只)和ETU畸形组(15只).RT-PCR检测妊娠第13、14、15、16天大鼠直肠及泄殖腔Wnt5a和BMP7的mRNA表达;Western blot检测妊娠第16天大鼠直肠Wnt5a和BMP7的蛋白表达;高位畸形、低位畸性患者及非胃肠道疾病死亡,分为高位畸形组、低位畸形组和对照组,RT-PCR和Western blot分别检测直肠末端Wnt5a和BMP7的mRNA和蛋白表达.结果 ETU组大鼠的Wnt5a及BMP7基因的mRNA表达在4个时间点均显著低于对照组,差异均有显著统计学意义(P<0.01);ETU畸形组大鼠的Wnt5a和BMP7的蛋白表达显著低于对照组,差异均有显著统计学意义(P<0.01),而大鼠ETU无畸形组Wnt5a和BMP7的蛋白表达与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);人高位畸形组大鼠的Wnt5a和BMP7的mRNA和蛋白表达均显著低于对照组,差异均有显著统计学意义(P<0.01),而人低位畸形组Wnt5a和BMP7的mRNA和蛋白表达与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 Wnt5a和BMP7基因的表达下降可能与先天性肛门直肠畸形有关.

  • 健康体检人群血清Wnt5a水平与腹型肥胖相关性的研究

    作者:刘玉苓;裴丽娜;都健;嵇兴梅;王天宝;杨晶;敖娜

    目的 探讨健康体检人群血清Wnt5a水平与腹型肥胖的关系. 方法 收集2011年4~5月于中国医科大学附属第一医院体检中心健康体检者176名,根据亚太地区成人体重分级建议分为3组:正常对照(NC)组63名,外周型肥胖组42例,腹型肥胖组71例.采用ELISA检测血清Wnt5a水平,比较组间血清Wnt5a水平并作相关分析. 结果 腹型肥胖组血清Wnt5a水平高于外周型肥胖组和NC组[(1.4l±0.49) vs (1.11±0.46) vs (1.09±0.34) ng/ml,P均<0.01],而外周型肥胖组血清Wnt5a水平虽高于NC组,但差异无统计学意义(P>0.05).相关分析显示,血清Wnt5a水平与BMI、WC、WHR、SBP、DBP、TC、LDL-C、TG呈正相关(P<0.05),而与年龄、FPG、HDL-C无相关性.多元逐步回归分析发现,SBP、TC是血清Wnt5a的独立相关因素. 结论 腹型肥胖血清Wnt5a水平升高,与BMI、WC、血脂、BP相关,提示腹型肥胖可能是Wnt5a升高的相关因素,影响脂代谢及高血压的发生发展.

  • 2型糖尿病患者血清Wnt5a与空腹血糖的相关性研究

    作者:康冰;左国庆;何松

    目的 探讨T2DM患者血清中Wnt5a水平及其与FPG等相关影响因素的关系. 方法 收集新诊断T2DM患者60例,另选取同期健康体检者(NC组)58名.ELISA检测两组血清Wnt5a水平,并分析Wnt5a与T2DM的相关性. 结果 与NC组比较,T2DM组年龄、BMI、SBP、FPG、HbA1 c、TG、载脂蛋白B(ApoB)和Wnt5a水平升高,HDL-C、FFA降低(P<0.05或P<0.01).Pearson相关分析显示,血清Wnt5a与BMI呈正相关(r=0.382,P=0.003);Spearman相关分析结果显示,Wnt5a与FPG、HbA1c、TG呈正相关(r=0.401、0.425、0.300,P<0.05).多元线性回归分析显示,年龄、HbA1c、TG是影响Wnt5a的相关因素. 结论 Wnt5a在T2DM患者血清中升高且与HbA1c呈正相关,提示Wnt5a与IR发生密切相关,可能参与了T2DM发生与发展.

  • 胃癌组织Wnt5a和MMP14表达及其临床意义的探讨

    作者:江州华;俞继卫;吴生华;李小强;吴巨钢;姜波健

    目的:研究Wnt5a和MMP14在胃癌组织中的表达,分析其与临床病理特征及预后的关系,并探索两者间表达的相关性.方法:Real-time PCR及免疫组化染色法检测胃癌原发灶和癌旁正常胃组织中Wnt5a和MMP14的表达,单因素和多因素分析其表达与临床病理特征和预后的关系.结果:胃癌原发灶中Wnt5a和MMP14在转录和翻译水平上的表达均明显高于癌旁正常胃组织中的表达(P<0.05),并且两者在胃癌原发灶中的表达呈正相关.此外,Wnt5a阳性表达组的肿瘤直径更大、位置更高、浸润深度更深、区域淋巴结转移数更多、TNM分期更晚及淋巴结转移率更高,存在淋巴管和血管浸润,P<0.05.MMP14阳性表达组与淋巴管浸润有关,但与血管浸润无关,且与浸润深度更深、区域淋巴结转移数更多、TNM分期更晚及淋巴结转移率更高相关,P<0.05.单因素分析发现Wnt5a阳性表达组的预后更差,MMP14表达与预后无关.但多因素Cox逐步回归模型分析仅发现浸润深度和区域淋巴结转移数是胃癌独立的预后因素.结论:Wnt5a和MMP14的表达在胃癌组织中呈正相关,可促进胃癌的侵袭和转移.此外,Wnt5a阳性表达还提示预后更差.

  • Wnt5a结肠腺瘤性息肉病基因和β-连环素在结直肠腺癌组织中的表达和意义

    作者:曹永成;杨帆;刘晓红;辛萱;王翠翠;耿明

    目的 探讨Wnt5a mRNA和蛋白、结肠腺瘤性息肉病基因(APC)和β-连环素(β-catenin)蛋白在结直肠腺癌组织中的表达及意义.方法 应用实时定量PCR法,检测30例新鲜结直肠腺癌组织和配对的癌旁组织中Wnt5a mRNA的表达.采用免疫组织化学SP法,检测62例结直肠腺癌和癌旁组织以及10例正常结直肠黏膜组织中Wnt5a、APC和β-catenin蛋白的表达情况,并分析Wnt5a、APC和β-catenin蛋白的表达与结直肠腺癌患者临床病理特征的关系.结果 Wnt5a mRNA在新鲜结直肠腺癌组织中的相对表达量为0.1232 ±0.0140,明显高于其在癌旁结直肠黏膜组织中的相对表达量(0.0497±0.0074,P=0.02).Wnt5a蛋白在61.3% (38/62)的结直肠腺癌组织中低表达,在38.7% (24/62)的结直肠腺癌组织中高表达,其表达与肿瘤的组织学类型和分化程度有关(均P<0.05).APC蛋白在61.3% (38/62)的结直肠腺癌组织中低表达,其表达与肿瘤的组织学分型有关(P<0.05).β-catenin蛋白在80.6% (50/62)的结直肠腺癌组织中呈胞质和(或)胞核的异位表达,其表达与肿瘤的分化程度、有无淋巴结转移、浸润深度以及TNM分期均有关(均P<0.05).在结直肠腺癌组织中,Wnt5a(r =0.271,P=0.027)和APC(r=0.343,P=0.004)蛋白的低表达均与β-catenin蛋白的异位表达相关,但Wnt5a与APC蛋白的表达无关(r=0.218,P=0.078).结论 Wnt5a、APC和β-catenin基因可能参与了结直肠腺癌的发生和发展过程.在结直肠腺癌中,APC和Wnt5a蛋白的低表达可能是β-catenin蛋白异位表达的原因之一.

  • Wnt5a基因在乳腺癌细胞株MCF-7中的表达及其与E-钙黏蛋白、波形蛋白基因的关系

    作者:邱霞;杨国荣;刘利;黄勇;曾若兰;姚晓艺;石静;吴至佛;汪灵;刘桂;蔡鑫嘉;黄俊辉

    目的:探讨Wnt5a基因在人乳腺癌细胞株MCF-7中的表达及其与E-钙黏蛋白、波形蛋白基因表达的相关性。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Wnt5a、E-钙黏蛋白mRNA和波形蛋白mRNA在MCF-7细胞和人正常乳腺上皮细胞株MCF-10A中的表达,分析Wnt5a表达与E-钙黏蛋白mRNA、波形蛋白mRNA的关系。结果 MCF-7细胞中,Wnt5a、E-钙黏蛋白mRNA水平均低于MCF-10A细胞[(16.93±2.97)%比(27.47±2.76)%,(12.97±1.35)%比(20.43±2.60)%,均P<0.05],波形蛋白mRNA水平高于MCF-10A细胞[(16.53±0.85)%比(6.33±2.08)%,P<0.05]。在MCF-7细胞中,Wnt5a与E-钙黏蛋白mRNA的表达呈正相关(r=0.997,P<0.05),与波形蛋白mRNA的表达呈负相关(r=-0.998, P<0.05)。结论 Wnt5a在人乳腺癌细胞株MCF-7中的表达低于人正常乳腺上皮细胞株MCF-10A,其在乳腺癌的发生与发展中可能发挥抑癌基因的作用。 Wnt5a在乳腺癌细胞中的表达与E-钙黏蛋白mRNA的表达呈正相关,与波形蛋白mRNA的表达呈负相关。 Wnt5a可能通过影响乳腺癌上皮细胞的转化导致乳腺癌的侵袭和转移。

  • Wnt5a在炎症微环境下的牙周膜干细胞中的作用研究

    作者:李影;刘娜;张维;顾斌

    目的:研究Wnt5a在炎症微环境作用下的牙周膜干细胞(periodontal stem cells,PDLSCs)中的作用.方法:有限稀释法分离获取PDLSCs并进行干细胞鉴定;实时定量qPCR检测正常PDLSCs组及炎症因子组(10ng/ml TNFα预刺激24h)炎症因子TNFα及IL-1β的mRNA表达水平;实时定量qDCR检测两组成骨诱导前后成骨基因Runx2、ALP的mRNA表达水平、Wnt5a的mRNA表达水平;Western Blot检测两组成骨诱导前后Wnt5a的蛋白表达水平.结果:炎症因子组与正常组的克隆形成率无显著性差异、炎症因子组TNFα mRNA表达水平IL-1β mRNA表达水平显著高于正常组(P<0.05);常规培养条件下,炎症因子组Runx2、ALPmRNA表达水平与正常组无显著性差异,成骨诱导后成骨基因表达水平正常组显著高于炎症组,(P<0.05);常规培养条件下,炎症因子组Wnt5a mRNA表达水平高于正常组(P<0.05),成骨诱导后正常组及炎症因子组Wnt5a mRNA表达水平均显著高于常规培养条件;Western Blot结果示,Wnt5a蛋白表达量正常组diff(成骨诱导后)、炎症因子组undiff(成骨诱导前)、炎症因子组diff分别为正常组undiff的1.2709倍、1.8246倍、2.2176倍.炎症因子组Wnt5a蛋白表达水平增加,成骨诱导后两组Wnt5a蛋白表达水平均增加,炎症因子组高于正常组.结论:在炎症微环境下,PDLSCs的炎症因子表达增加,成骨能力降低,Wnt5a mRNA及蛋白表达水平均增加,Wnt5a非经典通路可能通过与经典Wnt通路的交通等参与PDLSCs炎症及破骨的过程.

  • wnt5a诱导心肌祖细胞向心肌细胞分化的作用研究

    作者:吴良宇;向平;刘玲娟;何通川;房松华;吕铁伟;田杰;李谧

    目的 探讨wnt5a诱导心肌祖细胞CP15-5a向心肌细胞分化的作用.方法 利用HEK293细胞扩增重组腺病毒Ad-wnt5a和Ad-GFP;转染CP15-5a细胞后,设置wnt5a组、GFP组和空白对照组.采用流式细胞技术检测Ad-wnt5a和Ad-GFP的转染效率;1周后,通过实时定量PCR(qRT-PCR)检测经Ad-wnt5a诱导的CP15-5a细胞中心肌组织特异性转录因子GATA结合蛋白4(GATA4)、心肌增强因子2C(MEF2C)的表达;2周后,通过Western blotting及免疫荧光技术检测经Ad-wnt5a诱导的CP15-5a细胞中心肌连接因子43(CX43)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达;全细胞膜片钳技术检测钠电流(INa)表达.结果 Ad-wnt5a和Ad-GFP转染效率分别为42.8%、44.3%.腺病毒转染CP15-5a细胞1周后,wnt5a组GATA4和MEF2C基因的表达量(分别为1.717±0.220、1.847±0.190)较GFP组和空白对照组(GATA4:1.003±0.087、0.961±0.063,P<0.05;MEF2C:0.456±0.042、0.500±0.095,P<0.05)明显升高,而GFP组与空白对照组比较差异无统计学意义;腺病毒转染2周后,wnt5a组CX43和cTnT蛋白的表达量(分别为1.597±0.267、0.727±0.100)较GFP组和空白对照组(CX43:0.723±0.047、0.783±0.1333,P<0.05;cTnT:0.217±0.021和0.253±0.102,P<0.01)明显升高,而GFP组与空白对照组比较差异无统计学意义.与GFP组及空白对照组比较,wnt5a组可检测出INa.结论 wnt5a可诱导心肌祖细胞CP15-5a向心肌细胞分化.

  • 肾癌组织中Wnt5a的表达及其临床意义

    作者:朱能;覃丽;陈仙;王毅;罗志刚

    目的 探讨Wnt5a在肾癌组织中的表达与病理意义以及对肾癌细胞增殖及侵袭潜能的影响,为寻找肾癌有效的治疗途径及预后判定指标提供依据.方法 对43例肾癌组织标本和11例正常肾组织标本中的Wnt5amRNA和Wnt5a蛋白表达水平进行检测,分析肾癌组织Wnt5a mRNA表达与临床病理特征的关系,及Wnt5a蛋白表达与预后的关系.结果 Wnt5a mRNA和Wnt5a蛋白在肾癌组织中的阳性表达率均显著高于正常肾组织(P<0.05).肾鳞癌的Wnt5a mRNA表达水平明显高于肾腺癌(P<0.01);低分化组显著高于高分化组(P<0.01).Wnt5a蛋白阳性的肾癌患者2年生存率明显低于阴性患者(P<0.01).结论 Wnt5a表达水平在肾癌细胞中明显增高,且与肾癌的细胞分化程度、组织类型及预后密切相关,提示Wnt5a可能参与肾癌的发生发展过程.

  • 大鼠颌骨与胫骨骨髓基质细胞间接共培养后生物学差异的比较

    作者:金辰怡;刘宏伟

    目的 SD大鼠颌骨骨髓基质细胞(M-BMSCs)与胫骨骨髓基质细胞(T-BMSCs)体外间接共培养后,检测两者生物学特性和相关基因表达的变化.方法 应用全骨髓贴壁法,分离和培养M-BMSCs和T-BMSCs.取第三代细胞用Transwell小室间接共培养后,做以下检测.①MTT检测细胞增殖能力差异;②ALP活性、ALP染色、免疫荧光染色检测细胞成骨活性的差异;③荧光定量PCR检测Wnt1、Wnt5a、Hoxa1 1、Runx2、Ocn、Col I的表达差异和成骨诱导后的表达变化.结果 ①全骨髓贴壁法能分离和培养M-BMSCs和T-BMSCs;②间接共培养后,M-BMSCs和T-BMSCs增殖活力减弱;③共培养条件提高了T-BMSCs和抑制M-BMSCs早期表达ALP的能力;④间接共培养后,M-BMSCs和T-BMSCs中Wnt1、Wnt5a、Hoxa 11、Runx2、Ocn、Col I基因表达出现变化.结论 M-BMSCs和T-BMSCs间接共培养后,两者的生物学特点的改变和相关基因表达改变.

  • 烧伤脓毒症患者血清Wnt5a水平变化及其临床意义

    作者:尹朝奇;贺全勇;罗成群;周建大;朱颉;李萍;陈铁夫;彭浩;徐阳成;陈佳

    目的 观察烧伤脓毒症患者血清Wnt5a水平变化.方法 采集烧伤脓毒症患者的血清标本,采用Western blotting法检测Wnt5a水平,并比较轻、中、重度脓毒症患者血清Wnt5a水平.同期选取轻度烧伤的非脓毒症患者8例作对照.结果 烧伤脓毒症患者血清Wnt5a水平高于对照者.动态观察发现,脓毒症痊愈后患者血清Wnt5a水平降低,而随着脓毒症病情恶化血清Wnt5a水平持续升高.结论 Wnt5a参与了烧伤患者炎症的发病过程,且检测Wnt5a水平可作为炎症严重程度的诊断指标.

  • Wnt3a促进大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化

    作者:王小梅;穆长征;马云胜

    背景:Wnt信号通路是细胞增殖分化的关键调控环节,但与骨髓间充质干细胞神经分化的联系并不十分明确.目的:寻找促进骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的Wnt信号分子.方法:首先体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞并传代,行形态学观察,并以流式细胞学方法检测细胞表型CD44,CD9,CD34和CD45.采用碱性成纤维细胞生长因子分别联合Wnt3a或Wnt5a的方案诱导分化,应用免疫组化和反转录-聚合酶链反应方法比较Wnt3a和Wnt5a对骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的影响.结果与结论:骨髓间充质干细胞为长梭形,CD9,CD44高表达,CD34,CD45低表达.Wnt3a诱导组的巢蛋白和神经元特异烯醇化酶呈阳性,而胶质纤维酸性蛋白无明显表达,诱导后细胞的活力良好.Wnt5a诱导组巢蛋白呈弱阳性表达,而神经元特异烯醇化酶及胶质纤维酸性蛋白阴性.反转录-聚合酶链反应结果显示,Wnt3a诱导组巢蛋白在诱导前后均有表达,神经元特异烯醇化酶在诱导后5 d可见明显的扩增条带,10 d后更加明显.胶质纤维酸性蛋白在诱导10 d后出现较弱的扩增条带.Wnt5a组、对照组骨髓间充质干细胞在诱导后10 d巢蛋白有微弱表达,神经元特异烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白几乎无表达.提示Wnt3a分子能够促进体外培养的骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化.

  • Wnt5a调控牙源性干细胞作用研究进展

    作者:李由由;梁文红

    Wnt5a是非经典Wnt蛋白中具有代表性的蛋白,其介导的非经典Wnt信号具有调控细胞增殖、分化、迁移和极化的作用.近年来研究发现,Wnt5a及其介导的信号通路在调控牙源性千细胞方面起重要作用,其机制成为牙组织工程学研究热点,也为牙再生提供了新的思路.以下仅对Wnt5a及其介导的信号通路在牙源性干细胞方面的研究进展做一综述.

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