芦丁含药血清对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖与分化成熟的影响
摘要： 目的 研究芦丁含药血清(Serum of rats administered Rutin,SR)对体外培养大鼠乳鼠颅骨成骨细胞(Rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖和分化成熟的影响.方法 ①取出生24 h 内的Wistar 大鼠颅骨,采用酶解法分离获得成骨细胞,培养于含10%类标准胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS)的α-MEM 培养基中,37℃、5% CO2 和饱和湿度条件下培养,每3 d 换液1 次,至80%融合时传代.②按100 g 体重25 mg 芦丁的剂量灌服12 只成年大鼠,对照组用等体积生理盐水灌胃.采用心脏穿刺取血,血液静置2 h 后3000 rpm 离心10 min,上清即为芦丁含药血清(Serum rats administered Rutin,SR)或对照血清.以2.5%、5% 和10% 3 种浓度加入ROB 培养基,分别检测对细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性和钙化结节的影响.结果 2.5%、5%的SR 均促进细胞增殖[分别为(0.678±0.242)%、(0.796± 0.155)%],以5%浓度明显;10%浓度导致部分细胞悬浮死亡,表明浓度过高.成骨性诱导培养发现,5% 芦丁含药血清显著提高ROB 细胞ALP 活性,增加骨钙素分泌量(63.35±5.20)μg/μl.结论 芦丁经口服后的代谢产物能刺激成骨细胞增殖,促进其分化成熟.由于多数含芦丁的中药制剂均为口服,所以其代谢产物很可能是芦丁抗骨质疏松的有效成分,但其具体形式和作用方式尚待进一步研究.
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