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枳实含药血清对大鼠胃Cajal间质细胞内质网应激损伤的影响及机制

王远;凌江红;张丽敏;谭人千;王煜姣;张钰琴;谢天一;文一惠

摘要: 目的 探讨枳实含药血清对大鼠胃Cajal间质细胞(ICCs)内质网应激(ERS)损伤的影响及机制.方法 采用酶解法分离培养ICCs并行c-kit免疫荧光染色法鉴定细胞.使用衣霉素(Tm)构建ICCs内质网应激模型,4苯基丁酸(4-PBA)抑制内质网应激.血清药理学方法制备枳实含药血清.取对数生长期的ICCs,随机分为四组,ICCs组正常培养,ERS模型组予1μg/mL Tm处理,抑制剂组予含1μg/mL Tm和10 mmol/L 4-PBA处理,枳实组予1μg/mL Tm和20%枳实含药血清,每组作用时间均为24h.透射电子显微镜观察胃ICCs内质网的超微结构;实时荧光定量PCR法检测ERS相关因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、激活转录因子6(ATF6)mRNA表达.结果 成功分离、培养并鉴定ICCs.透射电子显微镜下正常ICCs的内质网结构正常,排列整齐;模型组ICCs细胞器减少,内质网肿胀,扩张、囊泡化改变、排列紊乱;枳实组ICCs内质网肿胀,呈局限性扩张.与ICCs组比较,ERS模型组GRP78、ATF6 mRNA表达升高(P均<0.05);与ERS模型组比较,枳实组GRP78、ATF6 mRNA表达降低(P均<0.05).结论 枳实含药血清可减轻ICCs细胞的ERS损伤,其机制可能与调控ERS ATF6通路有关.

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