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  • MicroRNA-101、L型钙通道β2及钠钙交换体在房颤病人血清中的表达变化及临床意义

    作者:李菲

    目的 比较MicroRNA-101(miR-101)、L型钙通道β2(L-type calcium channel β2 Subunit,CACNB2)及钠钙交换体(NCX)在房颤(AF)病人血清中的表达变化,并分析其临床意义. 方法 筛选2014年3月-2015年3月来就诊的100例AF病人为研究对象,设为试验组(n=100);同时选取100例正常病人作为空白对照组(n=100).试验时,分别应用荧光定量逆转录聚合酶链式技术(Real-Time quantity PCR)和免疫印迹(Western blot)方法检测两组右心耳组织中 miR-101和CACNB2、NCX的表达水平变化,探讨miR-101 与CACNB2、NCX表达水平的相关性,阐述 miR-101 在房颤发生与维持中可能机制及临床检测意义. 结果 ①治疗前,两组受试者在年龄、性别、手术方式等临床资料比较无有统计学意义(P>0.05),试验组左房内径(58.9±7.2)mm,大于对照组(37.9±8.1)mm,差异具有统计学意义(P<0.05).②实时荧光定量 PCR结果表明,AF病人右心耳组织中的microRNA-101表达量(0.620 7±0.132 1),较正常病人(2.310 0±0.342 2)低;AF病人右心耳组织中的CACNB2、NCX通道mRNA表达量(1.980 0±0.315 1,1.802 7±0.281 1),较正常病人(0.752 6±0.383 0,0.602 1±0.291 1)表达量高,组间差异具有统计学意义(P<0.05).免疫印迹(Western blot)结果表明,AF病人右心耳组织中的CACNB2和NCX蛋白的表达水平(1.36±0.18,1.46±0.12)均较正常病人(1.10±0.25,1.06±0.21)高,组间差异具有统计学意义(P<0.05). 结论 AF病人右心耳组织中 miR-101的表达水平与AF的发生具有相关性,CACNB2、NCX通道是miR-101的靶向调控位点,参与AF的发生.

  • 结肠癌组织中microRNA-101 microRNA-132及COX-2的表达与病理相关性分析

    作者:高文仓;朱红叶;张月蒙;俞森权;姚成

    目的 分析结肠癌组织中miRNA-101、miRNA-132及COX-2的表达与病理相关性.方法 收集2013年11月至2016年1月结肠癌病灶组织和癌旁正常组织各135例,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测组织中miRNA-101 mRNA、miRNA-132 mRNA和COX-2 mRNA的表达,并分析各基因的相关性及与结肠癌临床病理特征的关系.结果 与癌旁正常组织相比,结肠癌组织中的miRNA-101 mRNA和miRNA-132 mRNA的表达水平显著降低,COX-2 mRNA显著上升,差异有统计学意义(P<0.05);结肠癌组织中miRNA-101 mRNA、miRNA-132 mRNA和COX-2 mRNA的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期以及淋巴结转移有关;低中分化、TNM分期为Ⅲ期或Ⅳ期及淋巴结转移,结肠癌组织中miRNA-101 mRNA和micrRNA-132 mRNA的表达显著降低,COX-2 mRNA的表达显著提高(P<0.05);miRNA-101、miRNA-132与COX-2呈显著负相关(P<0.05).结论 结肠癌组织中miRNA-101和miRNA-132表达下调,COX-2表达上调与结肠癌的发展进程有关,可作为结肠癌治疗的潜在靶点.

  • miRNA-101在甲状腺髓样癌中抑癌机制的研究

    作者:徐明;崔鹏;叶敏;倪熊;王廷峰;闵志钧

    目的:研究microRNA-101在甲状腺髓样细胞中的抑癌机制.方法:首先用荧光定量PCR技术检测甲状腺髓样癌组织中microRNA-101的表达.接着采用rnicroRNA-101模拟物干预法,并用流式细胞仪技术,Transwell实验等方法,对实验组和对照组细胞的增殖、迁移和凋亡进行比较.此外,还通过Western blot、报告基因检测法、流式细胞仪技术和Transwell实验确定miRNA-101靶基因以及相应的抑癌机制.结果:miRNA-101在甲状腺髓样癌组织中的表达相比癌旁组织下调(P<0.01).与阴性对照组相比,miRNA-101模拟物转染组的甲状腺髓样癌细胞的增殖和迁移受到显著抑制,而凋亡率显著提高.Western blot和荧光素酶报告实验证实SOX9基因是miRNA-101下游的靶基因并被其下调.SOX9基因敲除可抑制甲状腺髓样癌细胞增殖,迁移和促进癌细胞凋亡.结论:microRNA-101通过靶向下调SOX9基因的表达抑制甲状腺髓样癌细胞的增殖和迁移,加速甲状腺髓样癌细胞的凋亡.

  • microRNA-101在结肠癌中的表达及与临床病理参数的关系

    作者:柳勤译;杨小乔;王伟福;李博;郭婉薇;许鸣

    目的 研究分析microRNA-101在结肠癌中的表达情况及与患者临床病理参数的相关性.方法 提取80例结肠癌患者癌组织及其正常结肠黏膜组织标本的总RNA,采用茎环逆转录及实时荧光定量方法(stem-loop-RT-qPCR)检测microRNA-101的表达量,统计分析microRNA-101表达情况与患者临床病理参数之间的关系.结果 结肠癌组织中microRNA-101的表达量明显低于癌旁正常结肠黏膜组织中的表达(P=0.001 8);microRNA-101在高分化患者的癌组织中表达水平较高,在低分化患者组织中表达水平低,差异有统计学意义(P<0.05);microRNA-101在TNM分期为Ⅰ和Ⅱ期的患者中表达量高于Ⅲ和Ⅳ期患者(P<0.05).结论 结肠癌组织中microRNA-101的表达降低对肿瘤的发生发展起到了重要的作用,microRNA-101具有抑癌基因的作用,从而为结肠癌的分子靶向治疗提供了新的靶点.

  • 上调microRNA-101沉默EZH2基因表达对人膀胱癌T24细胞系增殖和凋亡的影响

    作者:王海峰;杨宏;胡礼炳;霍倩;雷永虹;秦扬;李俊;毕城伟

    目的 探讨microRNA-1 01抑制靶基因EZH2对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 构建靶向EZH2基因的microRNA-101质粒并转染至人膀胱癌细胞中,采用RT-PCR法检测EZH2mRNA的表达情况,利用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞增殖抑制,通过Annexin V-FITC/PI流式细胞术实验观察转染后细胞的凋亡情况.结果 microRNA-101阳性对照组EZH2 mRNA较阴性对照组和空白对照组表达下降(P<0.05);在转染5d后,其生长抑制率明显高于对照组(P<0.01);microRNA-101组较阴性对照组及空白对照组G0/G1期细胞数明显增多,S期细胞数明显减少,凋亡率增加(P<0.01).结论 上调microRNA-101可抑制EZH2基因的表达,并有效的抑制人膀胱癌细胞的增殖,促进其凋亡,为深入研究膀胱癌的基因治疗提供理论依据.

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