杜仲叶提取物缓解体力疲劳功能试验

国内研究表明,杜仲叶和杜仲皮所含的化学成分基本相同[1-3],大致分为木脂素类、环烯醚萜类、苯丙素类、黄酮类、氨基酸和微量元素和多糖类等,二者的药理作用也基本相同,所以用杜仲叶代替杜仲皮既经济又实用.近年来,国内学者对杜仲叶保健功能进行了广泛的研究,如耐缺氧、抗氧化、提高小鼠免疫力、降血脂及对小鼠体能影响[4-8],本实验室就杜仲叶提取物对小鼠负重游泳时间、血清尿素和肝糖原的影响进行了初步的试验研究.

134 杜仲叶提取物的减肥作用

杜仲叶提取物对体外培养的成骨细胞代谢功能调节研究

目的：研究杜仲叶提取物对体外培养成骨细胞(Osteoblast OB)代谢功能的调节作用，从而进一步明确杜仲补肾、强筋健骨的作用机理以及筛选杜仲叶防治骨质疏松药效成分。方法：用杜仲叶三个提取部位(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)不同浓度对体外培养的成骨细胞作用。由新生SD大鼠头盖骨作原代培养，用传代的第一代细胞做药效试验。测定指标：(1)细胞增殖情况，用MTT计数法［1、2］；(2)碱性磷酸酶(ALP)活性测定，对硝基磷酸盐法。结果：Ⅱ、Ⅲ提取部位对细胞增殖作用与对照组比较P<0.001，ALP的活性与对照组比较，三个部位均为P<0.001。结论：表明Ⅱ、Ⅲ提取部位的10-5mg/L浓度组具有明显的调节骨代谢功能的药效作用。

杜仲叶提取物诱导羊骨髓间充质干细胞成骨及抑制其成脂肪分化

节骨代谢功能的药效作用,可促进成骨细胞增殖和碱性磷酸酶分泌.目的:探讨杜仲叶提取物诱导羊骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的同时,是否具有抑制成脂肪分化的作用.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-02/10在南昌大学第二附属医院分子中心实验室完成.材料:健康12月龄羊6只,由南昌大学提供.杜仲叶提取物由江两师大生物技术公司制备.方法:采用全骨髓法体外分离培养羊骨髓间充质干细胞,取第3代细胞,设立6组;空白对照组,加入DMEM+胎牛血清;传统成骨诱导剂组,加入含地塞米松、β-甘油磷酸钠、抗坏血酸的DMEM高糖培养基;传统成骨诱导剂+杜仲叶提取物组,在传统诱导剂组基础上加入10-5g/mL杜仲叶提取物;10-4,10-5,10-6g,mL杜仲叶提取物组分别加入对应质量浓度的杜仲叶提取物.同时另取第3代细胞行成脂肪诱导,分组同上,仅将传统成骨诱导剂更换为传统成脂诱导剂.主要观察指标:成骨诱导后,钙钻法检测碱性磷酸酶活性,Yon Kossa法观察矿化结节的形成,RT-PCR法检测成骨细胞中Cbfal mRNA基因的表达:成脂诱导后,油红O染色观察骨髓间充质干细胞成脂分化情况.结果:与窄白对照组比较,各成骨诱导组细胞内碱性磷酸酶合成增多,形成矿化结节,且传统成骨诱导剂+杜仲叶提取物组、10-4,10-5g/mL杜仲叶提取物组诱导成骨情况优于传统成骨诱导剂组、10-6g/mL杜仲叶提取物组;RT-PCR显示各成骨诱导组均能高效扩增出171 bp的Cbfa1基因转录片段,且成骨细胞中Cbfa1 mRNA表达水平差异无显著性意义(P＞0.05).油红O染色结果显示,加入杜仲叶提取物的各成脂诱导组,其脂滴数量明显少于传统成脂诱导剂组.结论:杜仲叶提取物能诱导体外分离纯化培养的羊骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化增殖,同时抑制其向脂肪细胞分化,实现双向调节作用.

杜仲叶及其提取物中绿原酸的反相高效液相色谱法测定

目的测定杜仲叶及其提取物中绿原酸的含量.方法反相高效液相色谱法.色谱条件:Elite Hypersil C18柱,以甲醇-0.5%醋酸(12:88)为流动相,流速1.0mL·min-1,进样体积20μL,检测波长327nm,柱温35℃.结果绿原酸对照品在0.64μg～20.5μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为99.86%.结论本方法快速、准确,重现性好.可用于杜仲叶及其提取物的质量控制.

杜仲叶提取物微胶囊化研究

目的:探讨杜仲叶提取物微胶囊化壁材选取及佳配比工艺研究.方法:选用阿拉伯胶和β-环状糊精(1∶1)做为杜仲叶提取物的微胶囊壁材,利用喷雾干燥进行微胶囊化.结果:阿拉伯胶和β-环状糊精(1∶1)做为杜仲叶提取物的微胶囊壁材,微胶囊化能达到较好的效果,芯材与壁材的佳配比为0.1g/g.

杜仲叶提取物对清醒大鼠血压的影响

目的:观察杜仲叶提取物急慢性降压作用.方法:以间接测压法测量清醒大鼠尾动脉血压:(1)测量自发性高血压大鼠(SHR)多次灌胃杜仲叶提取物的血压变化,观察其慢性降压作用.(2)测量肾性高血压大鼠1次灌胃杜仲提取物后1,2,4,6,8 h的血压,以观察提取物急性降压作用.结果:(1)连续18 d灌胃杜仲叶提取物4.2 g·kg-1或6.3 g·kg-1均明显降低SHR血压.(2)一次性灌杜仲叶提取物4.2 g·kg-1或6.3 g·kg-1均明显降低肾性高血压大鼠血压.结论:杜仲叶提取物有明显的降低急慢性血压作用.

杜仲叶提取物滴丸的溶出度研究

目的 考察杜仲叶提取物滴丸的溶出度.方法 以HPLC法测定样品中绿原酸的含量,研究了杜仲叶提取物滴丸的溶出条件,测定其溶出度,并与杜仲平压片进行比较.结果 杜仲叶提取物滴丸、杜仲平压片的T50和Td分别为2.31、3.71、33.0、39.1 min.结论 杜仲叶提取物滴丸的溶出度明显优于市售片剂.