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免疫不孕症的病因病机与治疗近况
精子具有抗原性,在某种情况下暴露于机体免疫系统诱发机体产生抗精子抗体(AbAs),导致免疫性不孕(育)症.男女双方或一方存在AbAs,均可导致不孕不育或造成反复流产.目前,西医多采用免疫抑制剂或人工授精等方法治疗,长期使用糖皮质激素有一定的副作用,而人工受精由于条件限制,很多医院不能开展.中医通过辨证论治治疗该病,取得显著疗效,妊娠率在25%～56.7%之间.
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温度对体外大鼠睾丸支持细胞增殖及occludin蛋白表达的影响
目的:通过观察不同温度对原代大鼠睾丸支持细胞增殖作用与紧密连接蛋白occludin( OCLN)表达的影响,探讨温度因素在男性生殖功能降低或男性不育中的作用机制. 方法:体外分离培养雄性Wistar大鼠睾丸支持细胞( Sertoli cell,SC),油红O染色及免疫组化FasL鉴定.实验分为对照组(34℃)和实验组(35℃、36℃、37℃、38℃、39℃).在相应的温度下培养4d后,CCK-8法检测SC增殖作用,HE染色观察细胞形态及结构,Western印迹法和免疫荧光法检测OCLN表达水平. 结果:体外培养SC的纯度为(96.20±1.95)％,CCK-8结果显示,细胞增殖活性在34～ 36℃时逐渐增强,36 ～ 39 ℃时逐渐降低,并在镜下观察发现细胞核固缩、裂解明显；免疫荧光及Western印迹显示,36℃时OCLN表达量高；高于36℃时,OCLN表达量随着温度的增加而降低(P＜0.01). 结论:温度升高(＞36℃)抑制SC的增殖活性,并降低SC紧密连接蛋白的表达量.因此,高温对SC活性和紧密连接完整性的影响,可能是导致男性生育能力下降或不育的机制之一.
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睾丸肿瘤的耐药机制及逆转方法
睾丸肿瘤是15～35岁年龄组为常见的实体肿瘤之一,近年来发病率有持续上升的趋势.睾丸肿瘤分为生殖细胞瘤和非生殖细胞瘤,前者占95%以上.目前睾丸肿瘤的治疗采取放疗、化疗及手术切除相结合的综合治疗措施,80%的病人经治疗后可获得缓解,其中播散型的睾丸肿瘤需要后继化疗以防止复发和转移,但是仍有15%～20%的病人由于对抗癌药产生多药耐药而导致死亡.临床上使用化疗药物时发现睾丸似乎是肿瘤细胞的避难所,如儿童急性淋巴细胞性白血病在化疗完全缓解后睾丸肿瘤复发率仍达到了17%,高于有血脑屏障保护的中枢神经系统的复发率[1].
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Rab13-蛋白激酶A途径调节体外培养支持细胞屏障通透性的研究
目的:研究Rab13蛋白在支持细胞(SC)屏障功能调节中的作用.方法:体外分离培养大鼠睾丸SC,Western blotting检测Rab13的表达,免疫共沉淀检测Rab13与蛋白激酶A(PKA)催化亚基间的相互作用;睾酮处理建立SC体外屏障增强模型,Western blotting和放射自显影法分别检测Rab 13的表达及PKA活性变化,并通过跨上皮电阻(TER)检测PKA活性对SC屏障功能的影响;小干扰RNA(siRNA)干扰Rab13表达,检测其对PKA活性及SC屏障功能的影响.结果:Rab13的表达随SC屏障的建立逐渐降低,且与PKA催化亚基间存在相互作用;睾酮处理可使Rab13的表达下降而PKA活性升高;Rab13 siRNA干扰可导致PKA活性升高,且SC屏障功能增强;抑制PKA活性可以拮抗睾酮或Rab13 siRNA对屏障功能的增强作用.结论:Rab13可通过调节PKA活性参与调节SC屏障通透性.
