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DNPH比色法:一种简单的蛋白质羰基含量测定方法
自由基对机体的氧化损伤大致分为5个方面:(1)对抗氧化系统的损伤;(2)对DNA的氧化损伤.(3)对脂质的氧化损伤,近几年发现的8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2 α)是自由基损伤细胞膜脂质更好的指标;(4)对蛋白质的氧化损伤;(5)对糖类的氧化损伤,反映自由基对糖影响的标志物目前还不多,常用的指标有透明质酸….蛋白质不仅是生物体的重要组成成分,而且在生命活动中担负重要的功能,在生物体中有催化、调节、转运、贮存、运动和支架作用等功能.对蛋白质氨基酸侧链的氧化可导致羰基产物的积累.蛋白质的羰基化被广泛地用于评价各种生物有机体的氧化程度[2],蛋白质羰基含量是蛋白质氧化损伤的敏感指标[3].2,4-二硝基苯肼(DNPH)比色法是测定蛋白质羰基含量的经典方法.目前这种方法在国内罕有报道和介绍,现就DNPH比色法的原理、具体实现方法、应用、特点以及本实验室在从事相关实验研究中获得的经验和一些值得注意的问题予以介绍.
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2,4-二硝基苯肼法测定南极登山队员尿液中的维生素C总量
目的 建立2,4-二硝基苯肼法分析南极登山队员尿液中的维生素C总量,了解南极登山队员的营养状况.方法 比色测定,由标准曲线计算尿液中的总抗坏血酸的含量.结果 在0 ~20 g/ml范围内含量呈线性关系,其回归方程为A =0.0 434C +0.0 116(C为g/rml).相关系数为R2=0.9 986,回收率在94.16%~112.24%之间.结论 2,4-二硝基苯肼法操作简便准确、价格低、干扰小、检出限低、线性范围广,适用于尿液中的维生素C总量的测定.