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Ku80在石英诱导细胞周期改变中作用
目的 探讨Ku80蛋白在石英诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)细胞周期改变中的作用及机制.方法 200 μg/mL石英按0、3、6、12、24 h处理各组细胞,采用RNAi技术抑制Ku80蛋白表达(H-Ku80),采用流式细胞术检测石英刺激24 h不同细胞系的细胞周期变化情况,免疫印迹技术检测不同细胞系各时间点细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)、E2增强子连接因子1(E2F1)蛋白表达和视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)表达及Rb-ser780磷酸化水平.结果 石英刺激对照细胞,G1期细胞所占比例从(89.28±2.19)%下降到(68.93±3.79)%;石英刺激H-Ku80,G1期细胞比例进一步减少,从(85.16±3.73)%下降到(59.92±3.31)%,差异均有统计学意义(P<0.05);抑制Ku80蛋白表达后,Rb蛋白表达水平无变化,石英诱导的Cyclin D1、CDK4水平增高受抑制,而E2F1、Rb-ser780磷酸化水平进一步增高.结论 Ku80参与石英诱导的细胞周期改变,对CyclinD1、CDK4的表达呈正性调节作用;而对E2F1表达及Rb-ser780磷酸化呈负性调节作用.