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人血凝块文献资料
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人血凝块提取基因组DNA碘化钾法建立
目的 通过与酚/氯仿法比较,建立一种快速、经济、高效从人血凝块提取基因组DNA的简易方法.方法采用双蒸水低渗破碎红细胞,碘化钾直接、快速裂解白细胞及其核膜,氯仿/异戊醇沉淀蛋白质及残存细胞碎片,后经异丙醇和乙醇沉淀基因组DNA.结果 采用该法提取的基因组DNA浓度为(46.4±8.8)mg/L,吸光度值A260/A280为(1.79±0.23),与酚/氯仿法(46.1±8.3,1.78±0.22)比较差异无统计学意义(P>0.05);2种方法 提取基因组DNA凝胶电泳条带完整,PCR扩增目的 条带完整,能够满足分子生物学实验要求.结论 碘化钾法是一种快速、简便、经济、高效提取人血凝块基因组DNA的方法,可以广泛运用于大规模人群基因组学研究.
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从极少量人血凝块中快速提取基因组DNA的方法
目的 建立从极少量血凝块中快速提取基因组DNA的方法,并对其应用价值进行评价.方法 分别对TIANamp基因组DNA提取试剂盒和TaKaRa全能基因组DNA提取试剂盒进行方法改良,并提取DNA,比较2种方法提取DNA的含量和纯度;并用人P450酶系的CYP3A4*4引物对提取的DNA进行PCR扩增,检测生物活性.结果 用TaKaRa全能基因组DNA提取试剂盒提取的DNA在含量、纯度和生物活性上均优于用TIANamp基因组DNA提取试剂盒提取的DNA.结论应用TaKaRa全能基因组DNA提取试剂盒可以对极少量的血凝块进行基因组DNA提取,方法简便快速,在分子生物学研究中有重要的实际意义和推广价值.
