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  • 抗人脑微血管内皮细胞单域抗体P5的制备及对人和大鼠血脑屏障的影响

    作者:王萍;王义宝;薛一雪

    目的 制备抗人脑微血管内皮细胞单域抗体P5,研究P5对大鼠血脑屏障结构的影响.方法 采用PCR技术将已获得的P5基冈片段克隆至载体pET-30a-c并测序确证,重组载体经转化诱导后通过Western blot鉴定.采用免疫荧光和免疫组织化学方法观察P5在人及大鼠脑微血管内皮细胞中的结合水平,透射电镜观察大鼠血脑屏障超微结构的变化.结果 Western blot结果显示表达产物的分子量为128 kD,随着单域抗体PS(1μg/ml)作用时间的延长,P5与人及大鼠的脑微血管内皮细胞结合水平增加.透射电镜结果显示随着给予单域抗体P5浓度的增大(1μg/kg,10μg/kg),脑微血管内皮细胞中吞饮小泡的数量呈现一定程度的增加.结论 成功获得抗人脑微血管内皮细胞单域抗体P5,P5能增加血脑屏障的胞吞转运.

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