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海绵状SIS文献资料
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SIS重塑为海绵状后对BMSCs诱导的软骨细胞增殖分化的影响
目的 观察大鼠骨髓干细胞(BMSCs)诱导分化的软骨细胞,在具有三维孔隙结构的海绵状猪小肠粘膜下层(SIS)表面的生长情况,探讨SIS由薄膜状重塑为海绵状后对软骨样细胞增殖分化的作用,为软骨组织工程提供新型的天然生物衍生材料.方法 原代培养SD大鼠BMSCs,流式术检测细胞表面抗原表达;诱导BMSCs分化为软骨细胞,甲苯胺蓝染色鉴定.按Abraham法将猪近段空肠制备成脱细胞的SIS,再将薄膜状的SIS经液氮低温研磨制成微粒,交联后采用冷冻干燥技术重塑形为具有三维孔隙结构的海绵状SIS.将软骨细胞与海绵状SIS共培养:扫描电镜观察细胞生长状态;Western blotting检测共培养组织ColⅡ的表达;DMMB法测量葡萄糖胺聚糖(GAG)表达量.应用材料浸提液培养软骨细胞,相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞的增殖.结果 原代培养的BMSC表达干细胞相关抗原,并可分化为软骨细胞,甲苯胺蓝将糖胺多糖染成蓝色.脱细胞的SIS未见有核物质,海绵状的SIS具有大量较均匀的三维孔隙.软骨细胞能在材料孔隙内良好生长,软骨分化指标Col Ⅱ与GAG表达量明显增加;浸提液培养的软骨细胞增殖能力强.结论 重塑形后具有三维孔隙结构的海绵状SIS促进BMSCs来源的软骨细胞增殖和分化,为软骨组织工程提供了新型的天然生物衍生材料.
