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激光扫描共聚焦显微镜术文献资料
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比较3种形态学方法观察成骨细胞矿化结节的应用价值
背景：矿化结节是成骨细胞分化成熟的标志，以往观察方法多采用茜素红等特殊染色法。
目的：比较茜素红染色-光镜、四环素荧光标记-激光扫描共聚焦显微镜、扫描电镜3种形态学观察成骨细胞矿化结节的方法，分析各自的特点及在骨病研究中的应用价值。
方法：将大鼠成骨细胞株UMR-106正常培养、每天换液，连续培养14 d，分别采用茜素红染色-光镜、四环素荧光标记-激光扫描共聚焦显微镜、扫描电镜观察矿化结节的形态结构，并利用扫描电镜结合能谱仪原位定量分析钙元素；此外，在培养中加入可抑制成骨细胞增殖、分化的肿瘤坏死因子α作为对照实验。
结果与结论：3种观察方法均可观察到正常成骨细胞矿化结节的形态结构。对于肿瘤坏死因子α抑制成骨细胞产生矿化结节的情况，经茜素红染色-光镜观察法，未见明显的矿化结节；而四环素荧光染色-激光扫描共聚焦显微镜观察法，可见清晰、稀少的矿化结节；扫描电镜观察法明显可见较少而细小的矿化结节，提示后二种方法灵敏度较高。此外，扫描电镜可将观察成骨细胞分泌钙质、形成矿化结节的亚细胞结构，与能谱元素分析结合，可实现矿化结节的定位与定量，在骨病研究中值得推广应用。
