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抑颤汤对帕金森病大鼠旋转行为、黑质细胞及神经递质的影响
背景:帕金森病不仅影响患者的运动功能,而且对感觉、认知也有严重影响.采用多巴胺类药物替代治疗,只能控制症状,并且副作用较大,临床应用中药经验方抑颤汤治疗帕金森病取得了较好的疗效.目的:观察抑颤汤对帕金森病大鼠模型行为学特征、脑组织儿茶酚胺类物质以及黑质神经细胞的影响,分析其可能的作用机制.设计:随机对照动物实验,检测者单盲评估.单位:解放军总医院中医科.材料:雌性SD大鼠120只,体质量180～200 g,将造模成功的70只帕金森病模型大鼠通过数字表法随机分生理盐水组30只和抑颤汤组40只,另取未经造模的大鼠30只作为正常对照组.抑颤汤由山萸肉15 g,石菖蒲15 g,仙灵脾10 g,肉从蓉10 g,枸杞子15 g,丹参15 g,蜈蚣8 g等组成,由解放军总医院中药房提供.按传统煎药法文火煎30 min滤取药液,以恒温水浴锅浓缩成含生药1.0 g/mL汤剂.方法:实验于2001-09/12在解放军总医院动物实验室(洁净级)完成.运用6-羟基多巴诱发法建立帕金森病大鼠模型,观察帕金森病大鼠行为特征.抑颤汤组帕金森病大鼠每千克体质量给药量按成人(60 kg)每千克体质量剂量(5 mL/kg)的10倍计算,灌胃给药,1次/d.每周称体质量1次,按体质量凋整给药量,连续给药8周.生理盐水对照组和正常对照组每日按体质量给予等量生理盐水灌胃.分别在给药前、给药第5,6,7,8周,观察正常组、生理盐水组(用药前称模型组)和抑颤汤组大鼠的旋转行为.采用微透析技术和高效液相色谱法测定各组大鼠脑组织细胞外液中儿茶酚胺类物质含量的变化,光学显微镜20倍、40倍及电子显微镜观察双侧纹状体黑质神经细胞的改变.主要观察指标:观察抑颤汤疗效及其对帕金森病大鼠脑神经介质的影响;光学显微镜及电子显微镜观察双侧纹状体黑质神经细胞的改变,评价抑颤汤的作用.结果:各组实验大鼠共100只,由于灌胃操作失当,抑颤汤组、生理盐水组和正常对照组分别死亡6,5,2只,终进入结果分析87只.①治疗第5,6,7,8周后抑颤汤组大鼠40 min旋转次数均明显低于生理盐水组[(112.34±33.36), (91.16±73.06), (72.05±20.77),(61.63±17.93),(340.90±52.97)次,P＜0.01].②帕金森病大鼠损毁侧脑组织透析液中3,4-二羟基苯酸、高香草酸、多巴胺、5-羟色胺水平明显低于未损毁侧(P＜0.05～0.01),治疗后抑颤汤组上述介质含量则明显高于生理盐水对照组(P＜0.05～0.01),而未损毁侧各介质的含量3组比较差异均没有显著性意义(P＞0.05).③病理学观察,抑颤汤组大鼠受损侧脑黑质神经细胞计数明显多于生理盐水组,且神经元体积较饱满,结构较清晰,细胞内高尔基氏体、线粒体等接近正常.结论:抑颤汤能减轻帕金森病模型大鼠脑黑质细胞的受损程度,促进其修复,提高脑组织中内源性儿茶酚胺类物质的含量,改善帕金森病大鼠的旋转行为.
