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  • 体外培养的人骨髓间充质干细胞多能性特征超微结构和细胞化学代谢分析

    作者:郭新;何旭;张丽红;李玉林;李一雷;朱桂彬;杨瑞光;赵维

    目的:探讨体外培养的人骨髓间充质干细胞多能性的超微结构和细胞化学代谢特征.方法:实验于2001-10/2003-03在吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室完成.标本来源于吉林省人民医院胸外科采集的穿刺骨髓血和胸外科手术切弃的肋骨,男7例,女3例,年龄>40岁5例,≤40岁5例(患者知情同意).采用Percoll密度分离与贴壁筛选结合法,从人骨髓血中分离纯化人骨髓间充质干细胞,通过流式细胞分析、细胞化学检测和透射电镜观察对其多能性和超微结构及细胞化学变化.结果:①流式细胞分析显示,采用聚乙烯吡咯酮包被的二氧化硅壳粒的无菌胶体悬液分离剂与贴壁筛选法能获得高度同源的细胞群;原代人骨髓间充质干细胞的增殖生长速度与年龄因素无关.②阿利辛兰-过碘酸雪夫染色,苏丹黑-B和碱性磷酸酶染色均证明人骨髓间充质干细胞具有特殊的代谢特点,含有大量无酸性粘多糖,无自发分化现象,并维持未分化状态.③超微结构显示人骨髓间充质干细胞表面有许多微绒毛,含有丰富的细胞器和糖原形成糖原池.结论:原代人骨髓间充质干细胞增殖生长速度不受年龄因素影响,提示利用自体人骨髓间充质干细胞移植治疗疾病成为可能.该细胞群在体外能很好地维持未分化增殖状态,提示其具有多向分化潜能.

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