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脉冲强磁场对小鼠H22肝癌杀伤作用的形态学研究
由于宿主的控制和癌细胞的反控制都和生物电磁现象有关.因此,近年来有关磁场对癌细胞生长分裂影响的研究引起了人们的关注[1-3].我们在原有研究的基础上[4-7],选用脉冲强磁场对接种H22肝癌的昆明小鼠进行实验研究,通过对组织形态学改变,特别是对其超微结构形态学的改变进行观察,探讨脉冲强磁场对肿瘤杀伤效应及有关机制.
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Wnt/β-catenin通路在脉冲强磁场促神经干细胞增殖中的作用初探
目的:摸索抑制神经干细胞(NSCs)中β-catenin表达的合适条件,为获得抑制β-catenin表达的NSCs做准备.利用抑制β-catenin表达的NSCs,探索wnt/β-catenin通路在脉冲强磁场促NSCs增殖中的作用.方法:取新生的SD大鼠双侧侧脑室下的NSCs,然后用无血清培养基培养14d.利用RNAi原理构建β-catenin shRNA慢病毒载体及阴性慢病毒载体,并转染NSCs,确定合适的感染复数(MOI)值.将NSCs分为阴性组(阴性病毒转染组)和实验组(β-catenin shRNA病毒转染组),并用4T、0.1 Hz、8次的脉冲强磁场干预.在用脉冲强磁场干预后的1d、7d,采用CCK8法检测阴性组和实验组的NSCs增殖情况.结果:β-catenin shRNA序列在MOI=10时,对NSCs中β-catenin的抑制效果好.阴性病毒组在脉冲强磁场干预后1d、7d时NSCs增殖明显(P<0.05),而实验组在干预前后NSCs增殖水平无明显变化.结论:wnt/β-catenin通路在脉冲强磁场促NSCs增殖中起作用.
关键词： 神经干细胞 脉冲强磁场 增殖 RNAi Wnt/β-catenin通路 -
脉冲强磁场诱导体外新生大鼠神经干细胞向神经元方向分化
目的 探讨脉冲强磁场对体外新生大鼠神经干细胞(NSCs)向神经元方向分化的作用.方法 体外分离培养新生3d内的SD大鼠脑室下区的NCSs,无血清培养14d后,随机分为实验组和对照组.实验组置于脉冲强磁场条件下用前期探索的促增殖参数(0.1 Hz、4T、8次)进行干预,每次脉冲放电20 ms.对照组置于相同条件下但不做干预处理.干预后第1天,采用10％胎牛血清诱导贴壁分化,显微镜下观察不同时间段细胞形态学变化;贴壁分化后第7天,通过免疫荧光染色、蛋白免疫印迹法(Western Blot)及实时定量聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测NCSs分化后第7天神经元βⅢ微管蛋白(TUJ1)及星形胶质细胞相关特异性标志神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 干预后,免疫荧光染色示实验组TUJ1阳性细胞数为(33.4±5.1)％,较对照组[(26.5 ±7.0)％]明显增多(P＜0.05),实验组的GFAP阳性细胞率[(23.9±5.0)％]较对照组[(36.2±2.2)％]明显减少(P＜0.05).RT-PCR检测显示,实验组TUJ1的mRNA表达量是对照组的(1.682 ±0.086)倍,GFAP的mRNA相对表达量是对照组的(0.590±0.157)倍,且组间差异有统计学意义(P＜0.05).Western Blot检测结果与RT-PCR检测一致,实验组TUJ1蛋白表达较对照组增多,GFAP蛋白表达较对照组减少.结论 脉冲强磁场具有促进NCSs向神经元分化,并抑制其向星形胶质细胞分化的作用.
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脉冲强磁场对新生大鼠神经干细胞β-连接素表达的影响
目的 通过检测神经干细胞β-连接素基因和蛋白的表达,初步探讨脉冲强磁场(0.1 Hz,4T,8次)促神经干细胞增殖的作用机制.结果 取新生SD大鼠双侧脑室下区神经干细胞,无血清培养2周,将细胞分成实验组和对照组.实验组的细胞给予0.1 Hz 4 T的脉冲强磁场下预8次；对照组的细胞置相同条件下不行干预.此后第1、3、5和7天,分别用RT-PCR和Western blot检测两组神经干细胞β-连接素的表达.结果 干预后第1、3、5和7天,RT-PCR法显示实验组神经干细胞β连接素基因表达较对照组明显增高(P＜ 0.05)；Western blot也显示实验组神经干细胞β-连接素蛋白表达较对照组明显增高,增高水平在干预后第7天显著.结论 新生大鼠神经干细胞经0.1 Hz,4T脉冲强磁场干预8次后,β-连接素在基因及蛋白水平均增高,提示脉冲强磁场(0.1 Hz,4T,8次)促神经干细胞增殖的机制可能是通过激活Wnt/β-连接素通路实现.
