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合体滋养细胞微泡对树突状细胞免疫功能影响实验研究
目的 研究小鼠合体滋养细胞微泡(STBM)对骨髓源性树突状细胞(BMDCs)免疫功能的影响.方法 2015年于第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科中心,机械分离法将小鼠胎盘剪碎,采用差速离心法制备合体滋养细胞微泡.添加重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-csf)、重组白细胞介素-4(IL-4)培养骨髓源性树突状细胞,6d后将其分为阴性对照组和实验组1、2、3、4以及阳性对照组.实验组1、2、3、4分别加入终浓度为1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L的STBM,阴性对照组加等量的磷酸盐缓冲液(PBS),阳性对照组加入2.0 mg/L的脂多糖(LPS),继续培养2d.流式细胞学技术(FCM)检测树突状细胞表面标志物CD11c及CD86的表达情况.同时ELISA法检测不同浓度STBM诱导下树突状细胞(dendritic cells,DCs)分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α),干扰素-γ(IFN-γ)及IL-12的含量.结果 不同浓度STBM处理后的BMDCs明显上调了CD11c、CD86的表达,其中1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L的STBM诱导DCs的CD1 1c/CD86双阳性表达率分别为46.1％、56.9％、60.5％、88.9％,与PBS组(18.2％)相比,差异具有统计学意义(P＜0.05).不同浓度的STBM刺激DCs后产生的TNF-α[(6.91±1.37)、(7.98±1.55)、(9.40±0.93)、(12.65±1.62)ng/L],IFN-γ[(12.14± 1.39)、(17.52±1.67)ng/L]及IL-12[(6.98±1.19)、(7.88±0.10)、(9.18±1.69)ng/L]分别与各PBS组[(3.61±0.64)、(3.15±0.90)、(3.51±1.09)ng/L]相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 STBM促进DCs的成熟,激活母体系统性炎症反应,可能是引起子痫前期发生重要原因.
