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壳聚糖水解酶文献资料
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对一种源于蜗牛的壳聚糖水解酶的不同纯化方法的选择
目的 研究源于蜗牛的壳聚糖水解酶的纯化方法,得到壳聚糖水解酶的纯品,从而为氨基酸序列分析、基因克隆及工业茵制备奠定前期基础.方法 对比疏水作用层析、离子交换层析、羟基磷灰石柱(HA)层析、凝胶过滤层析等方法纯化蜗牛酶的实际效果,确定纯化的佳条件,从而设计出合理的纯化方案.结果 分别用苯基琼脂糖柱层析,DEAE-Sepharose离子交换层析,羟基磷灰石柱层析,Sephacryl S-300凝胶过滤层析分离蜗牛酶,终确定为用弱阴离子交换填料DEAD-Sepharose,疏水作用层析,凝胶过滤层析进行分离.结论 本文探讨了蜗牛酶的不同纯化方法,建立了一种从蜗牛酶中分离高效高纯度壳聚糖水解酶的方法,为壳寡糖的酶解工业生产提供了新方法.
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壳聚糖水解酶活性测定中关键影响因素的考查
目的:考查并确定壳聚糖水解酶活性测定中的几个关键影响因素.方法:通过平行实验,对比在不同的酶浓度、pH和温度下酶活性的测定结果,终确定佳条件.结果:高浓度的蛋白质对酶活性有影响,调整蛋白质浓度7.26ug/ml,由于实验地点的改变,调整酶活测定时产物的测定温度为100℃,0.5mol/L的NaOH能有效测定酶活性.结论:建立了一种稳定而有效的壳聚糖水解酶的活性测定方法,为壳聚糖水解酶的纯化奠定了基础.
关键词： 壳聚糖水解酶
