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GM3通过MMP-9调节B16细胞的运动性
目的 通过不同的方法来研究GM3对MMP-9的调节作用.并进一步验证了GM3对细胞运动性的调节.方法 分别用RT-PCR,Zymography,HPTLC,western blotting和transwell的方法来检测MMP-9的mRNA表达水平,MMP-9的活性,GM3,Akt的磷酸化以及细胞的运动性.结果 通过几种不同的方法来研究是否GM3参与MMP-9的调空:a.通过转染半乳糖转移酶的顺反序列来调节GM3的表达,从而初步证明GM3可以调节MMP-9的表达;b.通过外加GM3可以清楚的观察到MMP-9的表达量升高.c.神经节苷脂抑制剂D-PDMP的加入更进一步的证明了MMP-9的表达始终与GM3的表达相关;另外,通过P13K抑制剂的试验进一步证明了GM3通过P13K来调节MMP-9的表达.在此基础上,更进一步的证明了神经节苷脂可以调节细胞的运动性.结论 GM3可以通过P13K/Akt信号传导途径来正调控MMP-9的表达,并且调节细胞的运动性.
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大蒜生理活性物质对胃癌细胞和黑色素瘤细胞抑制作用的研究
目的:研究大蒜生理活性物质对人胃癌细胞MGC-9和小鼠黑色素瘤细胞B16细胞增殖及细胞周期的影响.方法:用倒置显微镜观察细胞形态,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测B16细胞周期分布的影响.结果:经大蒜素及其前体物质蒜氨酸、蒜氨酸酶和蒜氨酸+蒜氨酸酶处理后,MGC-9和B16细胞不同程度变圆,体积缩小,脱壁细胞增多;除蒜氨酸酶外,蒜氨酸、大蒜素和蒜氨酸+蒜氨酸酶都能诱导MGC-9和B16产生时间和剂量依赖性的增殖抑制作用,其中蒜氨酸+蒜氨酸酶的作用尤为显著.大蒜素和蒜氨酸+蒜氨酸酶阻滞B16细胞于G_0/G_1期.结论:本文由大蒜提取物处理后结果与已发表的临床研究相一致.
关键词： 大蒜 大蒜素 蒜氨酸 蒜氨酸酶 人胃癌细胞MGC-9 小鼠黑色素瘤细胞B16 细胞增殖 细胞周期
