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人卵透明带3文献资料
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人卵GST-ZP3融合蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及其免疫原性的检测
目的:在大肠杆菌中表达人卵透明带3(Human zona pellucida3,HuZP3) 蛋白并对其进行纯化.方法:将HuZP3基因的核心片段克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,经过酶切和序列分析后,用重组质粒转化E.coli BL21,经IPTG诱导产生GST-HuZP3融合蛋白并通过Glutathione Sepharose 4B纯化.以纯化的融合蛋白免疫纯系Balb/C小鼠制备抗血清.抗血清的效价采用ELISA检测.结果:成功地构建GST-HuZP3融合蛋白表达载体,并在大肠杆菌中高效表达特异性的GST-HuZP3融合蛋白.以该融合蛋白免疫小鼠获得高效价抗GST-HuZP3抗血清,且该抗血清可识别大肠杆菌表达的重组ZP3.结论:获得高表达的GST-HuZP3融合蛋白并证实其具有良好的免疫原性,可作为抗原研制开发检测不孕妇女体内是否存在抗自身ZP3抗体的诊断试剂盒.