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乳腺癌CD4+CD25high Foxp3+调节性T细胞数量和分布及Foxp3mRNA表达与肿瘤分期的相关性研究
目的 研究乳腺癌患者CD4+CD25high Foxp3+调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)的存在数量、分布情况,及其功能基因Foxp3 mRNA的表达变化与国际抗癌联盟(UICC)乳腺癌的TNM分期的关系.方法 用四色流式细胞术以Foxp3-FITC/CD25-PE/CD4-PerCP/CD3-PC7抗体组合分析40名健康对照者及40例乳腺癌患者(临床TNM分期T1期9例、T2期10例、T3期12例、T4期9例)外周血、肿瘤组织浸润淋巴细胞(TIL)及癌旁淋巴结中CD4+CD25high Foxp3+ Treg的数量及分布情况.实时荧光定量PCR技术检测TregFoxp3mRNA表达水平.结果乳腺癌患者外周血CD4+CD25high Foxp3+ Treg占CD4 T细胞的百分比为(8.91±3.06)%,高于正常健康对照组(5.84±2.63)%,差异具有统计学意义(P＜0.05).乳腺癌患者TIL、癌旁淋巴结中Treg占CD4+T淋巴细胞比例均高于外周血,差异有统计学意义(P均<0.01).乳腺癌组织TIL和癌旁淋巴结中Treg的Foxp3平均荧光强度(MFI)显著高于外周血(P＜0.05).T1、T2、T3、T4期乳腺癌患者Treg比例分别为(5.81±1.89)%、(6.52±2.15)%、(9.65±3.14)%、(11.86±2.43)%.乳腺癌患者外周血单个核细胞Foxp3 mRNA表达水平明显高于健康对照组(P＜0.01).相关分析显示,Treg数量与肿瘤TNM分期显著相关(r=0.7 576,P＜0.01);Foxp3基因mRNA表达水平与乳腺癌TNM各分期呈显著相关性(r=0.6 129,P＜0.05).结论 乳腺癌患者CD4+CD25high Foxp3+ Treg的数量升高,其增高程度与肿瘤临床分期呈显著正相关.乳腺癌患者外周血和癌组织局部Treg的数量、分布情况及特异性转录因子Foxp3mRNA的表达强度均有所不同,提示这可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制,CD4+CD25high Foxp3+ Treg将来可作为乳腺癌患者病情进展的重要判断指标之一.
