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实时荧光定量RT-PCR技术检测siRNA对HBV复制的干扰效果
目的 运用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测小RNA分子(small interfering RNAs,siRNA)对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制的抑制作用.方法 在HepG2.2.15细胞内导入筛选的三条特异抗HBV的siRNA分子,用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测干扰后HBV的mRNA表达水平.结果 导入特异siRNA分子的细胞中HBV的mRNA表达量明显降低.结论 实时荧光定量RT-PCR技术能准确可靠的检测mRNA的表达水平,对siRNA分子干扰效果的评价有很好的应用价值.
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中药干预偏头痛大鼠脑膜核因子NF-кB mRNA表达的影响
探讨了中药干预偏头痛大鼠脑膜核因子的机制.选用成年SD大鼠,采用Cristina tassorelli方法制备偏头痛模型.分为正常组、模型组和中药组,后二组又分为0.5、1.5、2.5、4 h4个间隔点,以模型组做对照.运用实时荧光定量RT-PCR技术检测大鼠脑膜核因子的基因表达.结果表明:0.5 h组、1.5 h组和2.5 h组与模型组相比,P>0.05;4 h组与模型组相比,P<0.05,有统计学意义.中药干预偏头痛模型大鼠脑膜核因子可不同程度地抑制异常升高的脑膜核因子NF-кB mRNA的表达,说明中药干预可能是通过抑制脑膜NF-кB基因的过度表达而使颅脑血管舒缩系统障碍得到改善与治疗.该结论为研制以NF-кB为靶点的中药提供理论依据及治疗时间窗,并为临床治疗偏头痛提供深层次的客观依据.
关键词: 中药 大鼠 脑膜核因子 实时荧光定量RT-PCR技术