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成纤维细胞生长因子-21表达变化对3T3-L1脂肪细胞成纤维细胞生长因子受体及脂肪细胞因子的影响
目的 探讨FGF-21表达变化对FGF相关受体(FGFRs)和脂肪细胞因子表达的影响.方法 设计并构建2条针对小鼠FGF-21基因的短发夹状RNA(shRNA)序列,运用双荧光蛋白检测系统初步验证其有效性,筛选出抑制有效的pGenesil-FGF21重组质粒,分别用FGF-21过表达质粒pcDNA-FGF21和FGF-21 RNAi表达载体pGenesil-FGF21转染3T3-L1脂肪细胞,采用荧光定量PCR法检测FGF-21、FGFRs、脂联素、Visfatin以及瘦素(Leptin) 的mRNA表达水平.结果 成功构建2条FGF-21-shRNA重组质粒.转染上述重组载体的细胞内,两组pGenesil-FGF21 GFP平均荧光强度/RFP平均荧光强度均低于阴性对照组(均P<0.05),且pGenesil-FGF21-1组更低.转染pcDNA-FGF21的3T3-L1脂肪细胞内FGF-21 mRNA表达明显增加(P<0.01),转染pGenesil-FGF21-1的细胞内FGF-21 mRNA表达降低77.8%(P<0.05).FGF-21过表达的脂肪细胞内以β-klotho和FGFR1 mRNA表达明显升高,而Leptin mRNA表达明显降低;而FGF-21表达缺陷时则相反(均P<0.05).结论 FGF-21可能主要通过β-klotho和FGFR1途径激活受体后信号系统,并且可能通过影响脂肪细胞因子表达从而对代谢发挥其调控作用.
关键词: 成纤维细胞因子-21 RNA干扰 FGF相关受体 脂肪细胞因子