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CAPN1 RNAi文献资料
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RNAi沉默CAPN1基因对Aβ25-35诱导的原代神经细胞的神经毒性及凋亡的影响
目的 探讨CAPN1RNAi对Aβ 25-35诱导的原代神经细胞的神经毒性及凋亡的影响.方法 利用Aβ 25-35诱导原代胎鼠皮质神经元毒性损伤,观察CAPN1 RNAi对神经元细胞活力、凋亡的影响.实验分为4组:对照组(NC)、NC+ Aβ、CAPN1 shRNA+ Aβ、CAPN1 shRNA+ Aβ+ P25.CCK-8法检测神经元细胞活力的变化情况;Annexin V-PI方法进行细胞凋亡检测;Real-Time PCR检测转染CAPN1 RNAi后CAPN1 mRNA的表达水平;Western blotting检测CAPN1、CDK5、GSK3β、p-tau/tau蛋白表达的变化.结果 CCK8检测结果显示,与对照组相比,NC+ Aβ组细胞活力明显下降,转染CAPN1 shRNA后细胞活力有明显改善(P＜0.05);与CAPN1 shRNA+ Aβ组相比,CAPN1 shRNA+ Aβ+P25组细胞活力无显著性差异(P＞0.05).Annexin V-PI凋亡实验结果表明:与NC+Aβ组相比,转染CAPN1shRNA后细胞早期凋亡比例显著降低(P＜0.01).RT-PCR检测结果表明:与NC +Aβ组相比,CAPN1 shRNA+ Aβ组CAPN1 mRNA的表达显著得到抑制.Western blot发现NC+ Aβ组中CAPN1、CDK5、GSK3β、p-tau蛋白表达水平均显著升高,而转染CAPN1 shRNA后均显著下调(P＜0.01).结论 CAPN1RNAi可以显著改善Aβ 25-35诱导的原代神经细胞的神经毒性及凋亡.
关键词： CAPN1 RNAi Aβ 25-35 凋亡
