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重组人成纤维细胞生长因子21文献资料
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不同理化因素对重组人成纤维细胞生长因子21蛋白纯度的影响
目的:研究重组人成纤维细胞生长因子21 (rhFGF21)在不同保存条件下的稳定性,阐明温度、pH值、缓冲溶液和反复冻融因素对rhFGF21稳定性的影响,进一步完善纯化rhFGF21的工艺.方法:rhFGF21在不同温度(-20℃、4℃和25℃)、不同pH值缓冲液(醋酸-醋酸钠缓冲液pH 4.0和pH 5.0、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液pH 5.0和pH 6.0、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液pH 6.0、pH 6.5和pH 7.0,Tris-HCl缓冲液pH 7.5和pH8.0)中及反复冻融条件下分别保存,采用高效液相色谱法(HPLC)检测rhFGF21纯度,同时观察外观性状.结果:于-20℃和4℃分别保存时,rhFGF21的各项性质在观察期内均无明显变化;25℃时,rhFGF21存放14 d纯度由0d时(100.00±0.00)％下降至(15.20±0.14)％(P＜0.01);在pH4.0和pH5.0缓冲液中25℃条件下保存7d,溶液出现浑浊;在pH5.0和pH6.0缓冲液中25℃条件下保存7d,溶液出现浑浊;在pH 6.5和pH8.0磷酸盐和Tris-HCl缓冲液中,溶液澄清透明;rhFGF21原液反复冻融后其纯度变化差异有统计学意义(P＜0.05).结论:rhFGF21在低温和pH 6.5～8.0磷酸盐和Tris-HCl缓冲液中溶液较稳定,反复冻融处理对rhFGF21稳定性也有明显影响.
关键词： 重组人成纤维细胞生长因子21 纯度 稳定性 理化因素
