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五味子乙素对谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及其机制
目的:探讨五味子乙素(Sch B)对谷氨酸(Glu)致人神经母瘤细胞SH-SY5Y细胞损伤的保护作用,阐明其对ATR信号通路的影响.方法:将处于对数生长期的SH-SY5Y细胞分为对照组、DMSO组、模型组、Sch B1组、Sch B2组和Sch B3组.对照组SH-SY5Y细胞不做任何处理;DMSO组SH-SY5Y细胞用17 mmol·L-1 DMSO作用24 h;模型组SH-SY5Y细胞用20 mmol·L-1 Glu孵育24 h造成细胞损伤模型;Sch B1、Sch B2和Sch B3组采用0.05、0.10和1.00 μmol·L-1浓度Sch B预处理SH-SY5Y细胞24 h后再用Glu (20mmol·L-1)继续孵育24 h.MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blotting法检测ATR、p-CHK1、p-Cdc25c和P53蛋白表达情况.结果:MTT法检测,与模型组比较,Scb B1、Sch B2和Sch B3组细胞存活率明显升高(P＜0.05或P＜0.01),且Sch B2组细胞存活率高,故选取Sch B2组作为Sch B组进行后续实验.细胞周期检测,与对照组比较,模型组G0/G1期细胞所占百分比降低(P＜0.05),S期和G2/M期细胞所占百分比升高(P＜0.05);与模型组比较,Sch B组G0/G1期细胞所占百分比升高(P＜0.05),S期和G2/M期细胞所占百分比降低(P＜0.05).Western blottig法检测,与对照组比较,模型组细胞中ATR、p-CHK1、p-Cdc25c和P53蛋白表达水平明显升高(P＜0.05);与模型组比较,Sch B组细胞中ATR、p-CHK1、p-Cdc25c和P53蛋白表达水平均降低(P＜0.05).结论:Sch B对Glu致SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用,其机制可能与下调ATR信号通路、减少细胞周期阻滞有关.
