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相互作用蛋白筛选文献资料
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Mu2蛋白亚细胞结构定位及其相互作用蛋白的筛选
目的：采用果蝇S2细胞表达FLAG-Mu2蛋白，观察其亚细胞结构定位并纯化鉴定FLAG-Mu2质粒蛋白复合物，为 Mu2蛋白的研究提供依据。方法：FLAG-Mu2转染果蝇 S2细胞后表达 FLAG-Mu2融合蛋白，共聚焦激光扫描显微镜下观察 FLAG-Mu2蛋白的亚细胞定位，并通过核浆分离蛋白提取实验观察细胞核提取物中FLAG-Mu2蛋白的表达情况；采用免疫沉淀技术沉淀FLAG-Mu2复合物，并对其进行纯化及质谱测序以确定蛋白复合物的组分。结果：共聚焦激光显微镜下观察， FLAG-Mu2蛋白主要表达于细胞核中。核浆分离蛋白提取检测，融合蛋白相对分子质量约为140000，主要存在于细胞核提取物中。纯化 FLAG-Mu2蛋白复合物并进行蛋白质质谱分析，FLAG-Mu2复合物中可能含有 pif1A、CG31782、mip120、CG31690和 G protein-sa60A。结论：FLAG-Mu2蛋白在果蝇 S2细胞中主要定位于细胞核， FLAG-Mu2蛋白复合物中有5种可能的蛋白组分。
