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  • 人GnRH及其转运肽基因合成及鉴定

    作者:金元昌;刘利;苏晓艳;李景鹏;李会东;向育君;周建红

    目的人工合成人GnRH及转运肽(TRS)基因.方法根据已发表的人GnRH基因mRNA序列以及转运肽(9个左旋精氨酸)基因核苷酸序列,设计一对核苷酸,再用含7 mol/L尿素的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化,然后以这对核苷酸3′末端短互补序列退火、补齐,合成长达90 bp的目的序列GnRH/TRS.将其亚克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒pYC1.酶切鉴定筛选出阳性克隆pYC1,并测序.结果 GnRH/TRS序列由90个核苷酸组成,扩增产物与原设计序列同源性达100%.结论已成功合成人GnRH/TRS基因,为进一步研究和应用奠定基础.

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