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  • 人乳头瘤病毒16型晚期蛋白L1基因重组 MVA病毒的构建及鉴定

    作者:刘大维;姜春来;于湘晖;吴永革;金英花;孔维

    目的研制预防人乳头瘤病毒(HPV)感染的重组修饰的Ankara痘病毒(MVA)活载体疫苗.方法将HPV16L1基因插入MVA病毒转移载体psc11M2的P7.5启动子的下游,构建转移质粒psc11M2-L1,与MVA共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),进行同源重组.通过9轮蓝斑筛选,以PCR和Western blot鉴定重组病毒.结果获得的含目的片段的重组MVA病毒,表达产物与鼠抗人HPV16 L1抗体发生阳性反应,目的蛋白相对分子质量约为55 000.结论已成功地构建了可正确表达HPV16 L1基因的重组MVA病毒株.

  • 治疗性乙型肝炎病毒载体疫苗的构建

    作者:陈宇;杨小松;李惟;孔维

    目的 研制治疗慢性乙型肝炎的重组修饰的Ankara痘病毒(MVA)载体疫苗.方法 将HBV的表面抗原基因克隆到MVA病毒的重组载体pSC11上,重组质粒与空MVA病毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),进行同源重组.经过10轮筛选,挑选出阳性的重组MVA病毒.经PCR鉴定,感染不同细胞系,确定病毒表达量.结果 获得目的重组MVA病毒,ELISA检测到表面抗原在不同细胞系中的表达.结论 已成功地构建了表达HBV表面抗原的重组MVA病毒.

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