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基因工程菌株文献资料
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基因工程菌株BLG8900的遗传稳定性
目的 研究基因工程菌株BLG8900的遗传稳定性.方法 在有选择压力(加氨苄西林)的条件下,测定pYC2质粒在大肠杆菌BLG8900株[含有质粒pYC2的BL21(DE3)]中的遗传稳定性.结果 工程菌连续传10、25、50和100代后质粒具有良好的稳定性,而且经BamH I/EcoR I双酶切,酶切图谱相同.第100代菌株重组质粒的GnRH/TRS序列与原代菌株相同.原代与第10、25、50和100代菌株经IPTG诱导表达,GST-GnRH/TRS融合蛋白表达水平、菌体蛋白的SDS-PAGE图谱鉴定无明显差异.Western blot表明各代菌株表达产物均具有GnRH抗原特异性.结论 质粒pYC2在大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中有较好的遗传稳定性.
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基因工程菌SIPI-A0707代谢产物表柔红霉素的分离纯化工艺研究
目的 建立天蓝淡红链霉菌基因工程菌(SIPI-A0707)发酵液中表柔红霉素的分离纯化工艺.方法 调节发酵液pH值为5,用甲醇抽提表柔红霉素；先采用大孔弱酸性阳离子交换树脂D152,吸附流速为2mL/min,0.05mol/L HCl-50％丙酮解吸;然后采用氯仿-水萃取体系,萃取pH为6.5,反萃取使用pH为1.5的蒸馏水,后采用大孔吸附树脂Microsphere-1；吸附pH为7,吸附流速3mL/min,50％甲醇解吸分步收集,浓缩冻干.结果 表柔红霉素HPLC纯度达到98.1％,总收率为40％以上.结论 此工艺在生产上可行性较高,适合工业大量制备.
