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高尔基体囊泡转运蛋白P115基因沉默对胃癌细胞凋亡的影响及其机制
目的 探讨高尔基体囊泡转运蛋白P115基因沉默对胃癌BGC-823细胞凋亡的影响及其可能的相关机制.方法 将含p115基因的重组质粒P115 shRNA-1318转染BGC-823细胞,并设shNC(阴性对照)转染组和空白对照组,免疫荧光显微镜检测转染效果；RT-PCR法检测细胞中p115和巨噬细胞游走抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)基因mRNA的转录水平；Western blot检测细胞中P115、MIF及核内肿瘤抑制蛋白质P53的表达水平；MTT法检测细胞的增殖活力；流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期的分布.结果 转染后48 h,荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白的表达,表明转染成功；与对照组相比,p115 shRNA-1318组细胞中的p115和MIF基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平均明显降低(P＜0.05),细胞核内P53蛋白的表达水平明显增加(P＜0.05),细胞的增殖活力明显下降(P＜0.05),细胞凋亡数量明显增加(P＜0.05),G1/C2期细胞数量明显增多,S期细胞数量明显减少(P＜0.05).结论 沉默p115基因可促进胃癌细胞的凋亡,其调控机制可能是通过调控MIF因子来完成的.
关键词： P115 巨噬细胞游走抑制因子 肿瘤抑制蛋白质p53 胃癌 细胞凋亡 -
高尔基体在氧化应激中促凋亡作用的研究进展
高尔基体是细胞内重要的细胞器，除参与细胞内蛋白加工修饰、脂类代谢及囊泡转运等生理活动外，在离子稳态、应激等方面也发挥着重要作用。在氧化应激中高尔基体发生应激反应，功能上出现Ca2+/Mn2+泵活性改变，Ca2+/Mn2+稳态失衡；结构上出现高尔基体碎裂，释放应激性碎裂产物，上述行为将启动高尔基体相关凋亡通路，介导细胞发生凋亡。p115是高尔基体应激相关蛋白，在氧化应激中p115裂解后产生的碎裂片段通过促p53磷酸化而发挥促凋亡作用。
