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LppB基因文献资料
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丝状支原体丝状亚种SC型LppB基因的克隆与表达纯化
目的克隆丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)LppB蛋白基因,并进行表达及纯化.方法通过PCR,扩增MmmSC标准株PGl的LppB全基因,克隆至pMD18-T载体上,并测序鉴定.同时选LppB基因中两个TGA之间903 bp片段,与pET30a载体构建重组质粒,进行诱导表达,表达产物经Ni-NTA-His系统纯化.结果PCR扩增的LppB基因长度片段约1 869bp,与预期大小相符.将其与NCBI上发布的Afade株、LC型代表株Y-goat和同属的Bovine 7株的LppB基因序列相比较,同源性分别为99.8%、92.8%和76.7%,氨基酸同源性分别为99.2%、90.2%和67.0%.经Ni-NTA-His系统纯化,得到纯净的单一蛋白.结论已成功克隆了PG1的LppB蛋白基因,并进行了表达及纯化.
关键词： 丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC) LppB基因 克隆 表达
