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  • 快速琼脂糖基架填料替代纤维素基架填料纯化鼠神经生长因子

    作者:刘静;解红艳;罗亮

    柱层析法由于分辨率高,易控制,可自动化操作及有效保持生物分子活性而广泛应用于生物药物的下游纯化中.Whatman公司的纤维素基架填料亲水性好、载量高,因此常作为蛋白纯化的介质.但纤维素不耐受压力,即使高度铰链的纤维素,如CM52或DE52装填到柱子中,流速也很低,通常控制线性流速在25~40 cm/h之间,因此采用该介质的纯化周期过长,不利于提高样品的产量和稳定性.另外,纤维素基架填料会在不同盐浓度和pH值溶液中产生不同的膨胀系数,造成柱床体积的变化,操作压力也会因填料压缩而增大,致使操作流速经常变化.当样品黏度过高时,很难流过柱床.而纤维素介质也较难通过新版GMP的认证要求:一是介质不能进行在位清洗,清洗验证很难通过;二是对于过程中的关键参数,如流速、压力、柱效等不能进行很好的控制.

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