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Vero细胞宿主蛋白文献资料
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应用复合纯化介质Capto Core700纯化狂犬病疫苗
目的 应用复合凝胶Capto Core700作为纯化介质去除狂犬病疫苗中的Veto细胞宿主蛋白和宿主细胞DNA等杂质.方法 将Vero细胞接种至微载体,在celligen plus生物反应器中培养,按MOI=0.002接种狂犬病病毒,连续制备10批狂犬病疫苗原液.经过滤及浓缩后加入β-丙内酯,于2～8℃灭活24 h,获得病毒灭活液.上样至装载复合凝胶Capto Core700的纯化柱进行层析纯化,并按《中国药典》三部(2015版)的方法检测宿主细胞蛋白去除率、宿主细胞DNA去除率、狂犬病病毒糖蛋白回收率及总蛋白去除率.同时与传统Sepharose系列凝胶纯化方法进行比较.结果 10批疫苗纯化液的宿主细胞蛋白去除率为58.3％～63.2％,宿主细胞DNA去除率均＞90％,糖蛋白回收率范围为52.3％ ～ 74.5％,蛋白去除率范围为7.22％ ～ 11.76％.与传统Sepharose系列凝胶纯化方法比较,差异较小,且Capto Core700的上样量为3倍柱体积,高于Sepharose凝胶(15％).结论 Capto Core700凝胶可有效去除狂犬病疫苗中的杂质,缩短了纯化工艺时间.
