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低温高压匀浆文献资料
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表达乙型肝炎表面抗原重组汉逊酵母细胞破碎方法的比较
目的 比较球磨法、低温超高压破碎法和Yeast Buster酵母细胞裂解液法破碎表达乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的重组汉逊酵母(Hamenula polymorpha,HP)细胞的效果.方法 分别采用球磨法、低温超高压破碎法和细胞裂解液法破碎表达HBsAg的重组HP细胞和重组酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiea,SC)细胞,测定其细胞破碎率、细胞破碎后蛋白和HBsAg释出量,比较3种方法破碎细胞的效果.结果 球磨法使球磨罐和磨球中少量杂质渗入样品,其中氧化锆罐-氧化锫珠组合破碎重组HP细胞形成的杂质较少,破碎率约为60％,氧化锆罐-玻璃珠组合破碎重组HP细胞后蛋白浓度高达2.71 mg/ml,HBsAg释出量高为180.04 μg/ml;低温超高压破碎法破碎重组HP细胞破碎率高为71.18％,细胞破碎后蛋白浓度高可达6.72mg／ml,HBsAg释出量高为350.63μg／mnl;细胞裂解液法破碎细胞平均破碎率为60.30％,破碎不同次数的蛋白浓度及HBsAg释出量差异较大.结论 低温超高压破碎法更适合破碎表达HBsAg的重组HP细胞.
